Synergie et antagonisme dépendant de la concentration du linézolide et de la moxifloxacine dans le traitement de la tuberculose infantile: le duo dynamique

Contexte Aucun schéma thérapeutique n’a été spécifiquement conçu pour les enfants, chez lesquels la tuberculose est principalement intracellulaire. Étant donné leur activité en monothérapie et leur capacité à pénétrer de nombreux sites anatomiques pathologiques caractérisant la tuberculose disséminée, le linézolide et la moxifloxacine pourraient être combinés. Nous avons ensuite utilisé le modèle HFS du système de fibres creuses de la tuberculose intracellulaire pour identifier les schémas posologiques optimaux et les expositions de moxifloxacine et de linézolide en combinaison. Nous avons ensuite utilisé le modèle HFS de la tuberculose intracellulaire pour déterminer les doses optimales de moxifloxacine et de linézolide. Nous avons échantillonné le compartiment périphérique les jours,,, et pour la quantification de Vtt, et comparé la pente de la destruction microbienne de Mtb par ces schémas au régime standard de l’isoniazide, de la rifampicine et du pyrazinamide. , basé sur o n déclin exponentiel régressionRésultats L’ensemble des zones de synergie, d’antagonisme et d’additivité identifiées à la surface d’exposition-réponse a été ensuite utilisé dans le modèle HFS, avec des demi-vies observées de ± pour le linézolide et ± heures pour la moxifloxacine La constante du taux d’élimination était ± par jour avec le régime moxifloxacine-linézolide dans la zone d’additivité par rapport à ± par jour avec un traitement standard, se traduisant par une demi-vie bactérienne de jours vs jours, respectivement. schéma de base du linézolide et de la moxifloxacine qui pourrait être très efficace dans la tuberculose disséminée chez les enfants

tuberculose disséminée, modèle de système de fibres creuses, additivité, surface d’exposition-réponse, indépendance de BlissIl existe plusieurs défis dans le traitement des enfants atteints de tuberculose Premièrement, il est difficile d’obtenir des cultures; Deuxièmement, même si les profils de résistance étaient connus, aucun schéma n’a été développé pour traiter les enfants atteints de MDR multirésistante. tuberculose Troisièmement, alors que la tuberculose chez les adultes et les enfants est traitée par une polythérapie, il n’existe aucune donnée sur la synergie et l’antagonisme possibles des différents médicaments et de leurs doses pour le traitement des enfants. Cet aspect est crucial; dans la tuberculose adulte, la synergie in vivo de la rifampicine et de la pyrazinamide était centrale pour raccourcir la thérapie à des mois malgré le pyrazinamide ayant des taux modestes d’effet stérilisant en monothérapie En outre, nous avons démontré un antagonisme dépendant de la concentration de l’isoniazide et de la rifampine chez la souris, Quatrièmement, chez les nouveau-nés, les nourrissons et les tout-petits, la tuberculose extrapulmonaire est fréquente et implique souvent des sites tels que le péritoine, le système nerveux central et les os [- Les médicaments doivent être capables de pénétrer dans ces sites de manière adéquate si les enfants doivent être guéris Cinquièmement, dans l’enfance tuberculose intrathoracique et maladie disséminée, Mycobacterium tuberculosis Mtb est principalement intracellulaire Les médicaments qui ne pénètrent pas à l’intérieur des cellules ne tueront pas Vtt intracellulaire Cela signifie que les médicaments utilisés pour traiter cette maladie doivent être concentrés dans les cellules infectées, et non xpelled via efflux Ici, nous avons choisi d’examiner une combinaison de médicaments qui peuvent surmonter ces obstacles physiopathologiques. La moxifloxacine est une méthoxy-fluoroquinolone avec une activité bactéricide contre le Vtt extracellulaire qui se concentre jusqu’à l’intérieur des macrophages Deuxièmement, le rapport de la moxifloxacine zone sous la courbe concentration-temps AUC pour le liquide céphalorachidien CSF au plasma est -, que pour le plasma péritonéal au plasma, et que pour l’os au plasma environ Ainsi, la moxifloxacine entre de manière adéquate dans les sites les plus communs impliqués dans la tuberculose disséminée. est une pierre angulaire du traitement de la tuberculose multirésistante chez les adultes De même, le linézolide, une oxazolidinone, se concentre dans les macrophages sur la base de nos études et obtient une bonne pénétration dans plusieurs tissus. Rapports CSF-plasma & gt; Des concentrations moyennes de linézolide de – μg / mL ont été observées dans le liquide de dialyse péritonéal après administration systémique L’efficacité du linézolide est de plus en plus reconnue dans les cas de pharmacorésistance difficiles à traiter. En outre, le linézolide et la moxifloxacine sont disponibles en suspension orale et en sirop et, étant donné que les deux sont une concentration minimale inhibitrice d’AUC, peuvent être administrés une fois par jour. De plus, ils évitent la toxicité d’autres agents de deuxième ligne tels que l’ototoxicité. Finalement, ces agents ont différents mécanismes d’effet inhibition de la gyrase vs inhibition de la synthèse des protéines bactériennes. Il existe donc plusieurs raisons théoriques pour lesquelles une association linézolide-moxifloxacine pourrait être intéressante pour le traitement de la tuberculose chez les enfants. et l’additivité sont des déterminants importants de l’échec thérapeutique et de la mort chez les enfants, il sera important d’identifier les doses dans les zones d’exposition qui ne seraient pas antagonistes Cela signifie qu’il est nécessaire d’examiner les grandes surfaces d’exposition-réponse pour ces médicaments, et d’utiliser les données résultantes pour identifier un schéma thérapeutique d’association pour le traitement de la tuberculose disséminée chez les enfants

MATÉRIAUX ET MÉTHODES

Organisme

Mtb HRa ATCC non a été utilisé dans toutes les expériences Des cultures mères de Mtb stockées à-° C dans le bouillon Middlebrook H ont été décongelées avant chaque expérience et cultivées dans un bouillon Middlebrook H complété avec% d’acide oléique-dextrose-catalase à ° C sous un incubateur à agitation pour atteindre la phase logarithmique de croissance de phase

Matériaux et drogues

On achète du linézolide et de la solution de chlorhydrate de moxifloxacine à la pharmacie du Baylor University Medical Center On achète des bandelettes de test E à bioMérieux Marcy L’Etoile, France Unités de pénicilline-streptomycine / ml Gibco est utilisé avec le RPMI moyen du Roswell Park Memorial pour laver les monocytes infectés par Mtb On a acheté des cellules THP-dans des plaques THP, une lignée de cellules monocytaires de leucémie humaine, auprès de ATCC ATCC On a acheté des cartouches de fibres TIB-Hollow auprès de FiberCell Frederick, Maryland.

Mtb infection des cellules THP

Milieu RPMI préchauffé additionné de% de sérum fœtal bovin fœtal inactivé à la chaleur à ° C sous% CO pour cultiver les monocytes THP Les cellules THP ont été maintenues en sous-culture toutes les heures. La phase log a été utilisée pour infecter les cellules THP en co- À la fin de la période d’infection, les macrophages infectés ont été centrifugés à g pendant quelques minutes et les bactéries extracellulaires ont été lavées avec du RPMI additionné de streptomycine chaude, après quoi les cellules ont été comptées à l’aide d’un hémocytomètre et de Coulter. compteur

Détermination de la concentration minimale inhibitrice

La MIC de linézolide a été déterminée comme décrit dans l’article joint dans ce supplément La Moxifloxacine MIC a été identifiée en utilisant la méthode de microbroth dilution La turbidité de la culture Mtb log-phase a été ajustée à la densité bactérienne des unités formant colonies CFU / mL concentrations en moxifloxacine de,,,,,, et mg / L dans des boîtes bien en double, incubées à ° C sous% CO, et lues après les jours MIC a été définie comme la plus faible concentration qui empêche la croissance visible

Linezolid et moxifloxacine matrice d’activité combinée dans-plaques de puits

THP- monocytes à densité cellules / mL ont été activés pendant plusieurs heures en utilisant – M concentration finale phorbol myristate acétate dans des plaques bien Les cellules THP adhérentes ont été infectées avec Mtb en phase de croissance log et lavées deux fois avec du RPMI / FBS chaud. puis coïncidait avec des concentrations de moxifloxacine de,,,,, et mg / L en combinaison avec des concentrations de linézolide de,,,,, et mg / L, de sorte que chaque concentration de linézolide était combinée avec chaque concentration de moxifloxacine dans une matrice de puits , dans un total de trois puits mathématiquement, il s’agit d’un tableau rectangulaire ou matrice par matrice Les concentrations ont été choisies car elles représentent la CE, CE, CE, CE, CE et CE de chacun des médicaments dans les mêmes conditions expérimentales. la concentration efficace médiant X% de la destruction maximale Le contenu a été co-incubé à ° C sous% CO pendant plusieurs jours, après quoi les cellules adhérentes ont été lavées deux fois pour éliminer le médicament, puis lysées avec une solution saline tamponnée au phosphate avec% Tween- Les cultures ont été diluées en série, étalées sur de la gélose Middlebrook H et incubées à ° C sous% CO pendant des jours, après quoi les colonies ont été comptées.

Étude de combinaison de moxifloxacine et de linézolide dans le système à fibres creuses

Le modèle HFS de la tuberculose intracellulaire a été précédemment décrit en détail Vingt millilitres de cellules THP infectées par Mtb ont été inoculées dans le compartiment périphérique de chacun des HFS, avec RPMI circulant et% FBS. Trois HFS répliqués n’ont pas été traités. Les doses ont été choisies en fonction de l’analyse des résultats de la matrice d’activité linézolide-moxifloxacine avec les concentrations statiques de médicament décrites ci-dessus, ainsi que notre étude HFS en monothérapie, en utilisant des médicaments non traités. le rapport AUC – CMI ASC – heure, étant donné qu’il s’agit du facteur pharmacocinétique / pharmacodynamique du linézolide et de la moxifloxacine Nous avons choisi comme autres contrôles les expositions en monothérapie au linézolide associées à% et à la mort maximale EC et EC. Nous avons ensuite choisi une combinaison linezolid-moxifloxacine et un schéma posologique dans la zone d’antagonisme, et une combinaison de doses dans la zone d’additivité. Nous n’avons pas choisi Nous nous sommes intéressés à comparer les taux d’élimination de ces schémas thérapeutiques aux profils de concentration plasmatique-temps imitant une association médicamenteuse standard avec mg / kg d’isoniazide, mg / kg de rifampicine et mg. / kg de pyrazinamide, administré une fois par jour pendant des jours Des milieux frais ont été perfusés dans le HFS et pompés à des taux prédéfinis pour imiter le linézolide, la moxifloxacine, les acétylateurs lents d’isoniazide et les demi-vies de rifampine T / heures rencontrées chez les enfants vieilli & lt; ans Le pyrazinamide T / chez les enfants que nous avons imités était des heures Les profils de concentration de chaque antibiotique ont été validés en échantillonnant le compartiment central de chaque HFS à,,,,, et heures après la perfusion. Mtb UFC / mL et nombre de cellules THP-, les compartiments périphériques ont été échantillonnés les jours,,, et de traitement. De plus, des échantillons ont également été cultivés sur la gélose Middlebrook H qui a été complétée avec le MIC de moxifloxacine et le MIC de linézolide quantifier les sous-populations résistantes à la moxifloxacine et au linézolide à chacun de ces moments

Tests de concentration de médicament

Les concentrations en antibiotique dans les échantillons prélevés dans le compartiment central du HFS ont été analysées par chromatographie en phase liquide et spectrométrie de masse en tandem. Les dosages de linézolide, rifampine, isoniazide et pyrazinamide étaient tels que décrits précédemment La moxifloxacine a été achetée chez Sigma St Louis, Le Missouri et l’étalon interne de moxifloxacine-Cd ont été achetés à Santa Cruz Biotech Santa Cruz, Californie Calibrateur, contrôles, et étalon interne ont été inclus dans chaque analyse pour quantification Des solutions mères de moxifloxacine et étalon interne ont été préparées dans: méthanol: eau à concentration de mg / mL et stocké à – ° CA-courbe d’étalonnage du point a été préparé en diluant la solution mère de moxifloxacine dans un milieu sans médicament,,,,,, et μg / mL; Les échantillons de contrôle de qualité ont été préparés en ajoutant des étalons pour les niveaux de contrôle en mg / L et en mg / L. Les échantillons ont été préparés dans des plaques de microtitration par addition de μL de calibrateur, de contrôle qualité ou d’échantillon à μL % d’acide formique dans de l’eau contenant μg / mL d’étalon interne suivi d’un vortex La séparation chromatographique a été réalisée sur une colonne analytique Acquity UPLC HSS T -μm × -mm Eau maintenue à ° C à un débit de mL / min avec un gradient binaire avec un total durée d’exécution des minutes Les valeurs ioniques m / z observées des ions fragments étaient moxifloxacine m / z → et standard interne, moxifloxacine-CD m / z → L’injection d’échantillon et la séparation ont été effectuées par un UPLC Acquity interfacé avec un spectromètre de masse Xevo TQ Toutes les données ont été recueillies à l’aide de la version SCN du logiciel MassLynx. La limite de quantification de ce test était de μg / mL. Le coefficient de variation interday du test était de% ±% et le délai intrajournalier était de % ±%

Modélisation pharmacocinétique et pharmacodynamique

Pour l’étude de la matrice combinatoire médicamenteuse, l’effet des interactions AUZ / MIC linézolide et moxifloxacine a été calculé sur la base de l’indépendance de Bliss, mise en œuvre dans le programme MacSynergy II Ce modèle examine l’effet de chaque concentration médicamenteuse seule sur la monothérapie. dose dose, puis calcule l’effet additif théorique des concentrations de médicament Il calcule donc toute une surface d’additivité pour la matrice entière, pour donner l’effet attendu s’il y avait additivité Ensuite, la surface d’additivité théorique est soustraite de la surface d’effet observée expérimentalement pour donner un facteur d’interaction Si c’est négatif c’est à dire, l’effet observé est plus petit que prévu et l’intervalle de confiance% [CI] ne croise pas zéro, alors il y a antagonisme Si c’est zéro = observé, il y a additivité est plus grand que prévu, alors le facteur d’interaction sera positif, avec son plus faible% CI lié au-dessus de zéro. cSynergy II a été exporté à SigmaPlot Systat Software, San Jose, Californie pour un diagramme de surface à effet d’exposition -dimensional modélisation pharmacocinétique pour moxifloxacine, linézolide, isoniazide, rifampicine et pyrazinamide a été comme décrit dans les articles d’accompagnement dans ce supplément Les paramètres pharmacocinétiques identifiés ont été utilisés pour calculer l’ASC de chaque médicament dans chaque HFS, et donc les concentrations maximales de AUC- / MIC étaient celles mesurées à la fin de la perfusion de chaque heure dans les HFS. Pour les études HFS, nous avons calculé les régression Si les données incluaient & lt; Nous avons utilisé la régression linéaire pour ce résultat. Nous avons utilisé un modèle de déclin exponentiel, car les taux de destruction microbienne chez les patients suivent des modèles de déclin exponentiel Dans ce modèle, la constante de vitesse ± déviation standard a ensuite été comparée entre les régimes, ce qui s’est également traduit par une diminution de la charge bactérienne T /

RÉSULTATS

La CMI de la moxifloxacine était de mg / L, et la CMI du linézolide était de mg / L L’interaction des combinaisons de moxifloxacine et de linézolide AUC- / CMI dans la matrice par matrice est illustrée à la figure. , il existe différentes zones en fonction des paires AUC- / MIC: antagonisme, synergie et additivité Ainsi, la moxifloxacine et le linézolide sont à la fois synergiques et antagonistes, en fonction des concentrations médicamenteuses testées La synergie entre les médicaments était légère et dans une zone étroite décrite par une crête de linézolide AUC- / CMI de borné par la moxifloxacine AUC- / CMI de – La zone d’antagonisme était plus grande et plus profonde Figure Heureusement, la plus grande partie de la surface de la figure était caractérisée par une additivité

Figure Vue grandDownload slideExposé-réponse surface pour l’effet de combinaison linezolid-moxifloxacine contre Mycobacterium tuberculosis intracellulaire, dans les puits La figure montre l’antagonisme sur la surface délimitée par moxifloxacine – à l’heure de votre région sous la courbe AUC- / concentration minimale inhibitrice MIC ratios de – et Le ratio d’AUC / CMI du linézolide de -, montré en bleu foncé Le facteur d’interaction était -% intervalle de confiance [IC], – à – La zone de synergie était plus étroite, et était une crête le long d’un ratio AUC- / CMI de moxifloxacine AUC- / MIC ratios de – avec un facteur d’interaction de CI%, – Le reste de la surface, représenté dans les tons de vert, démontré additivité basée sur la constatation que l’effet observé moins l’effet attendu était nulFigure Voir grandDownload slideExposure-réponse surface pour l’effet de combinaison linezolid-moxifloxacine contre Mycobacterium tuberculosis intracellulaire, dans les puits La figure montre l’antagonisme sur la surface liée par moxifloxacine – à – heure de votre région sous la courbe AUC- / concentration inhibitrice minimale MIC rapports de – et linézolid AUC- / MIC ratios de -, montré en bleu foncé Le facteur d’interaction était -% intervalle de confiance [CI], – à – La zone de synergie était plus étroite, et était une dorsale le long d’un ratio AUC- / MIC de linézolide lié à la moxifloxacine AUC- / MIC de – avec un facteur d’interaction de CI%, – Le reste de la surface, montré dans les tons de vert , additivité démontrée basée sur la constatation que l’effet observé moins l’effet attendu était nul Pour le HFS, nous avons choisi la combinaison des doses qui permettraient d’atteindre les ratios AUC- / MIC dans la zone d’antagonisme et une deuxième combinaison de doses dans la zone d’additivité. Plusieurs profils concentration-temps différents, avec les constantes de vitesse d’élimination et T / s résultants montrés dans le tableau Les AUC- / CMI linézolides obtenus dans le HFS étaient les suivants: Dans le régime, le rapport était ±, dans le régime était ±, dans le schéma était ±Pour la moxifloxacine, les rapports AUC / CMI obtenus étaient ± en régime et ± pour le régime. Pour les médicaments de première intention standard, qui étaient sous traitement, pour lesquels l’ASC et le pic ont été associés à l’effet chez les adultes et les enfants , l’ASC / MIC de la rifampine était ± et pic / CMI ±, l’ASC / CIM de l’isoniazide ± et crête / CMI ±, et l’ASC / CMI pyrazinamide ± et crête / CMI ±

Tableau Pharmacokinetics de Linezolid et de moxifloxacin dans l’étude de fibre creuse Kel / h, moyenne ± SD Demi-vie, h, moyenne ± SD r Linezolid ± ± moxifloxacin ± ± rifampine ± ± & gt; Isoniazide ± ± & gt; Pyrazinamide ± ± médicament Kel / h, moyenne ± SD Demi-vie, h, moyenne ± SD r Linezolide ± ± moxifloxacine ± ± rifampicine ± ± & gt; Isoniazide ± ± & gt; Pyrazinamide ± ± Abréviation: SD, écart-typeView LargeFigure montre le nombre de cellules THP-viables au cours de l’étude Le nombre de cellules viables est une combinaison de l’effet de la charge bactérienne plus de macrophages meurent avec l’augmentation de la charge L’avantage majeur du traitement sur ce processus, avec un nombre de macrophages plus élevé le jour avec un traitement par traitement standard et certains schémas linézolide-moxifloxacine, par rapport aux systèmes non traités D’autre part, il convient de noter que la linézolide EC en monothérapie était associée avec le plus petit nombre de cellules viables, probablement à cause de la toxicité puisque l’ASC de mg × h / L excédait celle associée à la toxicité mg × h / L

Figure Vue largeTélécharger la lameEffet de la combinaison linezolid-moxifloxacine sur la viabilité des cellules THP- pendant la durée de l’étude sur les fibres creuses Les estimations sont des écarts moyens et standard pour les systèmes de fibres creuses réplicables Augmentation du nombre de cellules THP viables dans les schémas thérapeutiques standard L’exposition au linézolide associée au% de la chimiothérapie EC maximale entraîne une charge bactérienne élevée en raison d’une destruction inefficace et donc d’une mort cellulaire accrue. D’autre part, le faible nombre de cellules viables observées avec l’exposition au linézolide associé au% de l’exposition maximale à l’EC était probablement dû à la toxicité de la drogueFigure View largeTélécharger la lameEffet de la combinaison linezolid-moxifloxacine sur la viabilité des cellules THP- pour la durée de l’étude sur les fibres creuses Les estimations sont moyennes et standard d Évacuation pour les systèmes de fibres creuses répliquées Il y avait une augmentation du nombre de cellules THP viables dans les régimes recevant un traitement standard et des expositions additives par rapport aux témoins non traités, soulignant l’avantage du traitement avec des médicaments pour atteindre des expositions efficaces. de la destruction maximale Le régime EC entraîne une charge bactérienne élevée due à une destruction inefficace et donc une mort cellulaire accrue et, par conséquent, des cellules viables inférieures. D’autre part, le faible nombre de cellules viables observées avec l’exposition au linézolide L’exposition était probablement due à la toxicité du médicament La charge bactérienne totale à chaque point temporel d’échantillonnage dans chaque série de réplicats HFS est montrée dans la figure. Il n’y avait pas d’émergence de résistance dans aucun régime. La figure montre que les deux schémas thérapeutiques linézolides permettaient un certain degré de multiplication bactérienne , bien que la dose plus élevée ait été associée à une plus grande suppression de la croissance imen choisi pour être dans la zone antagoniste tenait à peine le fardeau bactérien au niveau du jour, comme prédit la figure montre que le régime choisi basé sur AUC- / MICs dans la région d’additivité de la matrice a été associée à la baisse de la charge bactérienne totale. modèles de régression de déclin exponentiel, la constante de vitesse de destruction était ± par jour r = avec ce régime moxifloxacine-linézolide vs ± par jour r = avec le régime standard de trois médicaments, calculant une viabilité bactérienne T / de jours vs jours, respectivement Ainsi, le régime standard à trois médicaments était associé à une élimination plus rapide que le régime basé sur l’additivité linézolide-moxifloxacine, mais d’un facteur de seulement%. Lorsque la charge bactérienne était exprimée en Mt uf CFU par monocyte THP, les résultats la gamme dynamique de déclin est plus petite; cependant, le schéma est le même que pour la charge bactérienne totale dans la figure, avec le même classement des régimes par le taux de destruction

Figure Estimer les courbes pour la charge bactérienne totale de chaque système de fibres creuses HFS Les estimations sont moyenne et écart-type pour HFS répliqué Le régime avec des expositions de surface de réponse antagoniste a tenu le fardeau bactérien autour du niveau de stase, puis échoué Comme prédit, l’exposition d’additivité régime a tué efficacement, comme le montre la diminution de la charge bactérienne Cependant, le taux d’élimination a été plus lent que celui de la thérapie standard Abréviations: UFC, unités formant des colonies; CE, exposition associée à% de destruction maximale; Les estimations sont des moyennes et des écarts-types pour le HFS répliqué. Le régime avec des expositions à la surface de réponse antagonistes a maintenu le fardeau bactérien autour du niveau de stase, Puis échoué Comme prévu, le régime d’exposition d’additivité tué efficacement, comme le montre la diminution de la charge bactérienne Cependant, le taux d’élimination était plus lent que celui de la thérapie standard Abréviations: CFU, unités formant des colonies; CE, exposition associée à% de destruction maximale; CE, exposition associée à% de destruction maximale

Figure Vue largeToile de téléchargementEffet de la charge microbienne sur les cellules THP- exprimé en rapport des unités formant des colonies au nombre de monocytes-THP Les estimations sont moyennes et écart-type pour les systèmes de fibres creuses répliquées. Le nombre de bactéries par cellule THP est un composé de Le schéma et l’ordre de classement des régimes basés sur les taux de destruction n’ont pas changé, même en tenant compte de la survie des cellules THP, et suivent celui de la charge bactérienne totale montrée sur la figure. le schéma d’exposition à l’additivité et le schéma thérapeutique standard se chevauchent complètement, de sorte qu’un seul est visible sur la figure Abréviations: EC, exposition associée à% de destruction maximale; CE, exposition associée à% de destruction maximale; Vaccin, Mycobacterium tuberculosisFigure Voir grandTélécharger la lame Effet de la charge microbienne sur les cellules THP- exprimé en rapport des unités formant des colonies au nombre de monocytes-THP Les estimations sont moyennes et écart-type pour les systèmes de fibres creuses répliquées. Le schéma et l’ordre de classement des schémas fondés sur les taux de destruction n’ont pas changé, même en tenant compte de la survie des cellules THP, et suivent celui du fardeau bactérien total représenté sur la figure. Les pentes pour le régime d’exposition à l’additivité et le régime thérapeutique standard se chevauchent complètement, de sorte qu’un seul est visible sur la figure. Abréviations: CE, exposition associée au pourcentage de destruction maximale; CE, exposition associée à% de destruction maximale; Mtb, Mycobacterium tuberculosis

DISCUSSION

Si une combinaison de médicaments est synergique ou antagoniste peut dépendre des concentrations testées Dans une étude clinique ailleurs, nous avons montré que l’antagonisme de l’isoniazide à la rifampicine et pyrazinamide pourrait entraîner des taux plus élevés de décès chez les enfants atteints de tuberculose La combinaison de linézolide et de moxifloxacine a été rapportée comme “synergique” in vitro contre des isolats cliniques. Nous montrons que la surface-réponse linézolide-moxifloxacine a des régions d’antagonisme et de synergie, en fonction des concentrations. L’importance de ceci est que dans l’identification des doses à utiliser dans une combinaison régime, les doses doivent être choisies de manière à éviter d’atteindre des concentrations dans les zones d’antagonisme du modèle HFS, le régime dans la gamme d’antagonisme a échoué et n’a maintenu que la charge bactérienne constante. D’autre part, le régime dont les expositions étaient dans les zones d’additivité était associé à un effet antimicrobien soutenu. Nous utiliserons cette combinaison médicamenteuse et les expositions associées à l’additivité comme épine dorsale. d’un schéma de traitement de la tuberculose intracellulaire chez l’enfant Cependant, il est important de noter que ces expositions de synergie et d’antagonisme sont spécifiques à ces médicaments dans ce régime particulier et ne peuvent pas être extrapolées à leurs congénères En outre, nous ne proposons pas directement administré aux enfants; plutôt, il forme l’épine dorsale d’un régime à examiner dans les essais cliniques. Les études de thérapie de combinaison dans les enfants où plusieurs différentes doses et combinaisons de dose sont examinées n’ont jamais été exécutées, même en première ligne, depuis le début de la chimiothérapie. Il existe un antagonisme et une synergie dépendants, notre étude fournit un paradigme de la façon dont ils peuvent être identifiés en utilisant des modèles précliniques et utilisés pour définir des gammes d’exposition optimales. Notre approche permet d’identifier une combinaison basée sur des pentes permettant d’identifier les schémas Lorsque ces données sont intégrées aux données sur la pharmacocinétique de la population et les distributions de CMI, ces plages d’exposition peuvent être utilisées pour optimiser la posologie et éclairer le développement de schémas thérapeutiques pouvant être testés chez l’enfant, maximisant ainsi les chances d’une bonne réponse. de linézolide et de moxifloxacine pourrait être eff Il est important que les enfants n’aient pas de cultures positives de Vtt sur lesquelles effectuer des tests de sensibilité aux médicaments L’un des objectifs actuels de la tuberculose pédiatrique dans la communauté mondiale est le développement de schémas posologiques travail sur des enfants sans distinction de tuberculose pharmacosensible et de tuberculose multirésistante Notre épine dorsale au linézolide-moxifloxacine fonctionnerait, que les enfants soient atteints de tuberculose multirésistante ou de maladie pharmacosensible. moins profond que le régime standard de la drogue, ce qui suggère que la thérapie peut prendre & gt; mois La toxicité dépendante de la concentration du linézolide et de la moxifloxacine chez les enfants est un sujet de préoccupation potentiel; cependant, cela pourrait être partiellement atténué en donnant des expositions associées à une efficacité optimale mais en dessous des concentrations toxiques, comme discuté dans l’article linezolid en monothérapie et dans l’article sur les simulations de Monte Carlo dans ce supplément la combinaison pour obtenir une réponse microbienne correspondant à celle de la thérapie standard, est rapportée dans un article d’accompagnement dans ce supplément Il y a des limites à notre étude. Premièrement, nous avons utilisé un seul isolat Mtb. Cette souche atténuée a réduit la virulence. D’autres antibiotiques dans l’infection intracellulaire ont montré une prédiction des événements chez les enfants infectés par différentes souches L’utilisation d’autres isolats avec des CMI différents dans les études pharmacocinétiques / pharmacodynamiques pourrait conduire à une meilleure généralisation. Cependant, la distribution MIC a été prise en compte Carlo simulations dans l’article d’accompagnement suivant dans ce supp En résumé, nous avons démontré que la combinaison de linézolide et de moxifloxacine est efficace contre le Vtt intracellulaire. Nous avons identifié les concentrations associées à la synergie, à l’additivité. , et l’antagonisme, pour la conception du régime Ces médicaments en combinaison à ces doses peuvent probablement former l’épine dorsale d’un régime double pour le traitement de la tuberculose à la fois sensible aux médicaments et MDR

Remarques

Soutien financier Le financement de cette étude a été assuré par l’Institut national des allergies et des maladies infectieuses du National Institutes of Health, sous le numéro de subvention R AIAuthor contributions T G et E N ont conçu l’étude; D D, S S et T G ont effectué les études sur les fibres creuses; D D a écrit le premier brouillon du manuscrit; DD, SS, EN, JGP, SS, et TG a écrit le manuscritSupplément parrainage Cet article apparaît dans le supplément “Un paradigme de développement pour de nouveaux schémas combinés pour la tuberculose multirésistante et pharmacosensibles chez les enfants: FLAME pour le travail et le jeu, “Parrainé par le Centre de recherche sur les maladies infectieuses et thérapeutique expérimentale CIDRET, Baylor Institut de recherche en immunologie, Baylor Research Institute Conflits d’intérêts potentiels TG est consultant pour Astellas Pharma USA et LuminaCare Solutions, et a fondé Jacaranda Biomed, Inc Tous les autres auteurs ne signalent aucun potentiel conflits Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits potentiels de conflits d’intérêts que les éditeurs considèrent comme pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués