Surveillance de la maladie associée au pneumocoque chez les enfants hospitalisés dans la province de Khanh Hoa, Vietnam

Contexte Pour comprendre l’épidémiologie des maladies bactériennes infantiles, y compris les pneumococcies invasives, une surveillance prospective a été menée auprès des enfants hospitalisés à Nha Trang, Vietnam. Méthodes d’avril à août, les pédiatres du Khanh Hoa General Hospital ont utilisé des critères de dépistage standardisés viagra-danmark.net. Les prélèvements de culture négatifs ont été testés pour Streptococcus pneumoniae par détection d’antigènes ou pour Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Neisseria meningitidis et S pneumoniae. par réaction en chaîne de la polymérase PCRResults Un total d’enfants ont été enrôlés avec une pneumonie, avec méningite, et avec d’autres syndromes compatibles avec une maladie bactérienne invasive; Sept% des hémocultures et% des cultures de LCR étaient positives pour tout agent pathogène bactérien, y compris pour H influenzae de type b et pour S pneumoniae. Le test de dépistage de l’antigène pneumococcique et la PCR ont identifié un autre enfant avec un pneumocoque invasif. maladie par test antigénique et par PCR Parmi les enfants âgés de & lt; Le taux d’incidence des infections pneumococciques invasives était au moins de 1% par cas, l’intervalle de confiance des enfants, le nombre de cas par enfant, le nombre d’enfants S pneumoniae et le type H influenzae b étaient les causes les plus fréquentes de bactériémie invasive confirmée en laboratoire. enfants La PCR et les tests antigéniques ont augmenté la sensibilité de la détection et fourni une estimation plus précise du fardeau de la maladie bactérienne invasive au Vietnam

À l’échelle mondiale, près de millions d’enfants âgés de & lt; des années meurent chaque année à la suite d’infections aiguës des voies respiratoires Les enfants subissent des millions de pneumonies par an, dont un million nécessitent une hospitalisation Des estimations récentes de l’UNICEF suggèrent que Streptococcus pneumoniae représente chaque année% des décès infantiles dus à la pneumonie Avec les interventions actuellement disponibles, il est probable qu’une grande partie de ces décès pourrait être évitée grâce à un meilleur accès à un traitement médicamenteux approprié, ainsi qu’à l’immunisation avec des vaccins antipneumococciques conjugués Une aide financière est accordée au Vietnam par l’Alliance GAVI Il existe peu d’informations sur l’épidémiologie et la distribution sérotypique des maladies pneumococciques invasives chez les enfants vietnamiens. Cette pénurie de données représente un obstacle important à l’introduction des vaccins antipneumococciques conjugués dans les programmes d’immunisation systématique des nourrissons. Pour aider à combler ces lacunes. , l’Institut National e d’Hygiène et d’Epidémiologie a initié une étude pilote pour décrire les hospitalisations associées à une maladie bactérienne invasive chez les enfants dans la province de Khanh Hoa au Vietnam et pour fournir de nouvelles perspectives sur les méthodes optimales de surveillance des maladies bactériennes invasives au Vietnam

Méthodes

Population étudiée et hôpital Avant le début de cette étude, le protocole de recherche a été examiné et approuvé par l’Institut national d’hygiène et d’épidémiologie et le service de santé provincial de Khanh Hoa et l’Institut international de vaccination. L’hôpital général de Khanh Hoa KHGH, situé à Nha Trang, la capitale de la province de Khanh Hoa, dans le sud-est du Vietnam, a recensé une population totale de résidents, dont la majorité vit à Nha Trang. Le KHGH est un hôpital de référence provincial qui fournit des services médicaux de soins primaires et tertiaires et un service de laboratoire clinique qui effectue des tests biochimiques, hématologiques et microbiologiques de routine

Conjointement avec le Plan de développement accéléré et d’introduction des vaccins antipneumococciques PneumoADIP, voir l’annexe dans ce supplément. Inscription des patients et tests de laboratoire Les enfants étaient admissibles à cette étude s’ils étaient âgés de moins de 18 ans. Après l’admission à l’hôpital, l’achèvement des formulaires de consentement éclairé par les parents ou les tuteurs, et l’inscription à l’étude, les patients ont subi une collecte de sang et des échantillons de LCR appropriés à leur présentation clinique syndrome Les échantillons ont été immédiatement transportés vers le laboratoire clinique de l’hôpital et les tests ont été initiés en h après la collecte des échantillons. Des services d’analyses microbiologiques étaient disponibles h par jour, jours par semaine, en routine ou sur appel Service de coloration de Gram sur tous les échantillons de liquide céphalorachidien conformément aux techniques standard Un test immunochromatographique de l’antigène pneumococcique NOW S pneumoniae Antigen Test; Binax a été réalisée sur tous les spécimens de CSF recueillis et un échantillon représentatif de spécimens de surnageant de culture de sang prélevés chez des enfants inscrits de juillet à août a été étalé sur gélose agar au sang trypticase soja avec du sang de mouton. agar et a été incubé selon les procédures de culture bactérienne standard Pour les cultures de sang, un minimum de mL et un maximum de mL de sang ont été inoculés dans des milieux commercialement préparés BACTEC PedsPlus / F; Becton Dickinson Des cultures de sang ont été inspectées manuellement deux fois par jour pour vérifier la croissance bactérienne. Des techniciens de laboratoire ont effectué des sous-cultures de routine à h, h et jours d’incubation en transférant des gouttes de chaque spécimen de culture sur des plaques de gélose au sang. Tous les isolats bactériens stockés dans du lait écrémé, des spécimens de surnageant de culture hémorragique et des échantillons de liquide céphalorachidien ont été expédiés dans des cryotubes étiquetés à – ° C au Laboratoire de biologie moléculaire du Département de médecine clinique, Institut de Médecine tropicale, Université de Nagasaki, Nagasaki, Japon, pour tests par PCR Tous les échantillons de CSF disponibles ont été testés par PCR, et un échantillon non aléatoire de spécimens de surnageant de culture hémorragique a été identifié pour être testé en utilisant un algorithme signes et symptômes, nombre total de globules blancs et radiographie thoracique Les échantillons congelés de CSF et de surnageant de bouillon de culture sanguine ont été traités pour extraction d’ADN avec le QIAamp DNA Mini Kit Qiagen conformément aux instructions du fabricant, et les extraits d’ADN ont été conservés à – ° C avant la PCR de PCR au Bacteriology Molecular. Laboratoire avec détection multiplex de pathogènes bactériens invasifs Des amorces pour la détection d’Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis et S pneumoniae ont été utilisées pour des échantillons de bouillon de culture sanguine, et des amorces pour la détection de H influenzae, Neisseria meningitidis et S pneumoniae Après l’inscription à l’étude et la collecte des échantillons cliniques, tous les parents ont eu une entrevue standardisée le jour de l’admission à l’hôpital. Le personnel médical de l’hôpital a utilisé un formulaire normalisé pour recueillir des informations sur les signes et les symptômes de la maladie. l’histoire, l’examen physique, et démographique et ho Les données du formulaire de rapport de cas ont été inspectées par les épidémiologistes du service de santé provincial de Khanh Hoa avant la saisie des données. Les données ont été saisies deux fois et des vérifications automatiques de la gamme et de la cohérence ont été effectuées pour tous les champs de données. Pour maintenir la qualité des données tout au long de la période d’étude, le personnel scientifique de l’Institut national d’Hygiène et d’Epidémiologie et l’International Vaccine Institute ont effectué des revues hebdomadaires Les données de l’étude ont été analysées en mode univarié et bivarié, pour décrire les caractéristiques cliniques, épidémiologiques et de laboratoire des enfants atteints de pneumonie, de méningite et d’autres maladies graves. Les comparaisons statistiques pour les variables catégorielles ont été réalisées en utilisant le test exact χstatistic et Fisher. Les taux d’incidence des IPD confirmés en laboratoire et Hib influenzae de type b étaient limités aux enfants vivant dans le district de Nha Trang, parce que cette population le KHGH comme seul fournisseur de soins médicaux pour toute maladie grave Les IC% pour les estimations d’incidence ont été calculés en utilisant la méthode de score de Wilson

Résultats

Étude des enfants D’avril à août, un total d’enfants ont été inclus dans l’étude. Une majorité [%] était âgée de & lt; mois, y compris les nouveau-nés% âgés & lt; mois mois Un% supplémentaire était âgé – mois et% ans – mois Parmi les enfants étudiés,% étaient des hommes et% résidaient dans le district de Nha Trang, où se trouve l ‘hôpital d’ étude KHGH Parmi tous les participants, il y avait des cas de décès taux de mortalité,%, incluant% nouveau-nés et% enfants hospitalisés pour pneumonie

Figure Vue largeDownload distribution des patients inscrits à l’Hôpital général de Khanh Hoa, Nha Trang, VietnamFigure View largeTélécharger slideAge distribution des patients inscrits à l’Hôpital Général de Khanh Hoa, Nha Trang, VietnamEnfants atteints de pneumonie La pneumonie clinique était le diagnostic le plus fréquent chez les participants Sur la base des définitions de cas de PneumoADIP, voir l’annexe de ce supplément,% des enfants ont eu un syndrome de pneumonie clinique Parmi ceux-ci,% ont eu un diagnostic confirmé par radiographie thoracique et% avaient une maladie sévère ou très grave

Tableau Vue largeTélécharger Diapositive Répartition des enfants inscrits dans une étude de surveillance hospitalière, par groupe d’âge et définition de cas, à l’Hôpital général Khanh Hoa, Nha Trang, Vietnam, avril -August Table View largeDownload slideDistribution des enfants inscrits à une surveillance hospitalière étude, par groupe d’âge et définition de cas, à l’Hôpital général de Khanh Hoa, Nha Trang, Vietnam, avril-août Enfants atteints de méningite, septicémie ou autre maladie Parmi les enfants restants,% avaient une méningite,% avaient une maladie très grave et% a eu d’autres maladies Quinze enfants avec une suspicion de méningite et% avec une maladie classée comme très grave ont eu des échantillons de LCR. Il y a eu des décès parmi les enfants ayant reçu un diagnostic autre que la pneumonie, y compris des enfants suspectés de méningite. avec un taux de létalité de la maladie très grave,% Deux des enfants avec une suspicion de méningite qui sont décédés ont eu une clinique complète et un laboratoire y Évaluation, y compris la ponction lombaire Aucun enfant atteint de méningite probable ou définitive n’est décédé, mais les enfants présentant des handicaps associés à la méningite ont été identifiés à la sortie de l’hôpital: a été classée comme ayant une méningite bactérienne probable et une maladie très sévère. Résultats positifs et% des cultures du LCR ont eu des résultats positifs. Six enfants avaient des cultures positives pour Hib, y compris des cultures positives de LCR et des hémocultures positives. Un enfant avait une hémoculture positive pour S pneumoniae, mais aucun enfant n’avait de culture de LCR. positif pour S pneumoniae Quatre enfants avaient des cultures positives pour d’autres agents pathogènes Staphylococcus aureus, Salmonella typhi et Enterobacter cloacae Parmi les enfants dont les résultats de culture étaient positifs,% étaient âgés de ⩽ mois

Tableau View largeTélécharger slideDistribution des patients par catégorie de cas et résultats des tests de laboratoire à l’Hôpital général de Khanh Hoa, Nha Trang, Vietnam, avril -Août Table View largeDownload slideDistribution des patients par catégorie de cas et résultats des tests de laboratoire à l’Hôpital Général Khanh Hoa, Nha Trang , Vietnam, Avril -August Antipneumococcique et tests PCR Des tests non-basés sur la culture de pathogènes bactériens invasifs ont été appliqués de manière pilote, afin de mieux comprendre les bénéfices potentiels de ces tests au Vietnam. Des tests anti-pneumococciques ont été effectués sur un total de % Des échantillons de LCS qui ont été cultivés et des spécimens de surnageant de culture de sang% des échantillons de sang qui ont été cultivés En raison des contraintes de ressources pour les tests de laboratoire, l’utilisation de tests de diagnostic non-culture était nécessairement limitée. des échantillons de surnageant de sang a été priorisé sur la base du nombre total de GB de l’enfant, mesurée sur le jour de l’admission et avant l’administration d’antibiotiques PCR sur des échantillons de LCR% des spécimens de CSF cultivés qui contenaient un volume suffisant pour les tests, et des surnageants de culture sanguine% des échantillons de sang cultivés chez des enfants avec des numérations globulaires élevées Parmi les enfants ayant des échantillons de LCR ou de sang négatifs pour la culture, le test antigène pneumococcique et la PCR ont identifié un autre enfant atteint de PI, dont% avec pneumonie et% avec méningite. d’autres enfants ont eu une pneumonie sévère ou très grave confirmée par radiographie du thoraxSi les enfants ayant des cultures négatives aux pneumocoques ont été diagnostiqués comme étant atteints d’une pneumococcie par test antigénique ou PCR, ont eu des résultats positifs au test antigène pneumococcique. avait des résultats positifs de PCR pneumococcique, a reçu un diagnostic de pneumonie confirmée par radiographie thoracique et diagnostic de méningite définitive Parmi les enfants ayant eu des résultats positifs au test antigène pneumococcique,% ont reçu un diagnostic de pneumonie et% ont reçu un diagnostic de méningite.

Figure Vue large Diapositive de téléchargement Diagramme des catégories de cas cliniques, avec une culture pneumococcique et des catégories de tests non basés sur la culture. PCR et un test immunochromatographique de l’antigène pneumococcique NOW Streptococcus pneumonia Antigen Test; Binax ont été réalisées pour un nombre sélectionné de patients seulementFigure View largeTélécharger Diapositive Diagramme des catégories de cas cliniques, avec culture pneumococcique et catégories de tests non basés sur la culture PCR et un test immunochromatographique de l’antigène pneumococcique NOW Streptococcus pneumonia Antigen Test; Étant donné que cette étude a recruté des enfants soupçonnés de méningite bactérienne, les échantillons de chaque patient ont été soumis à des tests de routine pour les principaux agents pathogènes bactériens invasifs de la méningite à prévention vaccinale H influenzae, N meningitidis et S pneumoniae. Quatre enfants atteints de méningite ont eu des cultures de LCR positives pour le Hib et ont eu des hémocultures positives pour l’enfant Hib avec une pneumonie confirmée par radiographie pulmonaire et une pneumonie sévère confirmée par radiographie du thorax. Résultats positifs pour Hib, y compris avec pneumonie confirmée par radiographie thoracique et avec pneumonie grave confirmée par radiographie thoracique Incidences estimées de la maladie IPD et Hib Parce que l’accès aux soins de santé en particulier l’accès de la population de Nha Trang à KHGH est excellent, nous avons utilisé à partir du service de santé provincial de Khanh Hoa pour estimer les taux d’incidence minimaux pour les cas confirmés de pneumococcie invasive, y compris les enfants ayant des résultats positifs aux tests de culture et de non-culture et au tableau des infections à Hib. Au cours des années qui ont vécu à Nha Trang, le taux d’incidence estimé des cas de PI était de 1 cas par enfant. Les cas par enfant représentaient le deuxième taux le plus élevé de maladies bactériennes invasives chez les enfants de moins de 18 ans. Les taux d’incidence spécifiques au groupe d’âge pour la MIP et la maladie à Hib étaient les plus élevés chez les nourrissons IPD incidence, cas par enfant [% IC, – cas par, nourrissons]; Incidence de la maladie Hib, cas par enfant [IC%, – cas par nourrisson] et chez les enfants âgés de 15 ans, incidence par IPD, cas par enfant, âge des enfants [% IC, – cas par, âge des enfants]; Incidence de la maladie Hib, cas par enfant, âge des enfants [% IC, – cas par, enfants âgés ans]

Tableau View largeTélécharger les diapositives Taux d’incidence des infections invasives à pneumocoques et à Haemophilus influenzae de type b Hib chez les enfants de moins de 1 an; ans dans le district de Nha Trang, province de Khanh Hoa, VietnamTable View largeTélécharger la diapositive Taux d’incidence des infections invasives à pneumocoque et Haemophilus influenzae de type b Hib chez les enfants âgés de & lt; ans dans le district de Nha Trang, province de Khanh Hoa, Vietnam

Discussion

Les résultats suggèrent que l’utilisation de tests non culturaux peut augmenter la détection globale des IPD et Hib, comparé à l’utilisation de méthodes de culture seules. Dans cette étude, les tests de non-culture du LCR par PCR ont produit des rendements plus élevés que ceux des antigènes pneumococciques. ces résultats peuvent sous-estimer le nombre réel d’échantillons de LCR positifs pour le pneumocoque, parce que le test d’antigène pneumococcique a été réalisé sur moins de la moitié des échantillons de LCR avec un volume suffisant pour tester les tests PCR pour Hib. enfants atteints de la maladie Hib invasive Ce test PCR supplémentaire a augmenté la détection globale de la maladie Hib confirmée en laboratoire, par rapport à la détection par culture seule Le rendement diagnostique par PCR des échantillons de CSF dans cette étude est conforme aux conclusions de Kennedy et al , qui ont trouvé que la PCR pour tester Hib et les pneumocoques dans le LCR a identifié d’autres enfants qui n’ont pas reçu de diagnostic par Cette étude pilote au Vietnam fournit des leçons importantes pour la surveillance en laboratoire des maladies bactériennes invasives dans les populations des pays en développement tropicaux ou subtropicaux. Premièrement, la mise en œuvre de procédures opératoires standard pour le diagnostic microbiologique est essentielle pour améliorer la détection des pathogènes dans les pays en développement. En raison de l’évolution de l’épidémie d’infection par le VIH et du SIDA au Vietnam, il est possible que les cas de PI chez les enfants et les adultes infectés par le VIH et / ou le SIDA contribuent au fardeau global de la maladie au Vietnam. L’amélioration de la surveillance au Vietnam peut également identifier les cas de PI qui surviennent parmi ces groupes à haut risque, en particulier dans les grandes villes et dans les zones frontalières où la séroprévalence est élevée. Deuxièmement, l’évaluation clinique standardisée des maladies fébriles chez les enfants, comme la méningite, la pneumonie. et la septicémie peuvent être difficiles lorsque les cliniciens doivent Dans la province de Khanh Hoa, les épidémies saisonnières de dengue entraînent souvent l’hospitalisation, le diagnostic et le traitement de nombreux enfants suspectés de dengue Bien que la différenciation de la fièvre dengue puisse souvent se faire à partir d’infections bactériennes. la base de signes cliniques et de symptômes, l’hémoculture systématique pour tous les enfants hospitalisés avec suspicion de dengue peut identifier d’autres enfants atteints de maladies bactériennes invasives, mais pourrait conduire à un rendement global inférieur des tests d’hémoculture Cette étude fournit de nouvelles perspectives sur les infections pneumococciques et Hib chez les enfants au Vietnam Sur la base du nombre de cas détectés seulement parmi les résidents de Nha Trang, cette étude a trouvé des incidences globales minimales de maladie pneumococcique et de Hib chez les enfants âgés de moins de 18 ans. Bien que les enfants et les familles aient un très bon accès aux soins de santé primaires et à la prise en charge de maladies graves, cette étude n’a pas été conçue pour recruter des enfants qui se présentaient dans des cliniques externes et compte tenu de la sous-utilisation. Les taux d’incidence observés dans cette étude peuvent sous-estimer le fardeau total de la MPI et de la maladie Hib. Le taux d’incidence estimé des IPD de l’enfance rapportés dans notre étude se situe dans la fourchette des taux d’incidence déclarés d’études de population parmi les Australiens non autochtones. ainsi que les études réalisées au Royaume-Uni et en Israël, mais sont légèrement supérieures au taux rapporté dans une étude de Hong Kong L’incidence de la maladie Hib rapportée dans cette étude est légèrement plus élevée que l’incidence de la méningite à Hib outil d’évaluation de la charge de morbidité pour le Viêt Nam dans les cas par cas, les enfants âgés de moins de 18 ans; ans et est un peu plus élevé que l’incidence rapportée pour la méningite à Hib dans les cas de Hanoï par les enfants âgés de moins de 10 ans; Il s’agit de la première étude systématique de la maladie bactérienne invasive dans un hôpital provincial du Vietnam qui incorpore des méthodes classiques de culture bactérienne et des méthodes de test non-culturales pour la détection de pathogènes bactériens invasifs chez les enfants présentant des syndromes cliniques majeurs. pneumonie, méningite, septicémie et autres maladies graves Les leçons de cette étude sont utilisées pour développer d’autres études prospectives basées sur la population chez les enfants vietnamiens, et elles seront utiles pour concevoir des systèmes de surveillance qui évaluent l’impact futur du vaccin conjugué Hib après son introduction dans le calendrier de vaccination de routine du Vietnam En outre, les efforts de renforcement des capacités de cette étude procurent des avantages directs, car les scientifiques nationaux de santé publique travaillent à établir un laboratoire national de référence Hib et pneumococcique à l’Institut national d’Hygiène et d’Epidémiologie. Hanoi Une telle capacité de laboratoire national sera essentiel pour soutenir les études qui estiment le fardeau de la PI dans d’autres régions du Vietnam

Remerciements

Nous remercions Sung-Hyun Chanson Samchundang Pharm, Séoul, Corée, pour un don de kits Binax NOW pour le test de l’antigène pneumococcique dans cette étude; Les Drs Dong Nguyen, Hoa Lan Nguyen, Hideki Yanai, Phu Quoc Viet, Thi Thi Ngo, Truong Tan Minh et Vu Dinh Thiem, pour leur aide lors de la formation à la surveillance et la collecte de données; Thanh Hien Nguyen, pour la gestion de bases de données; Min Kyoung Oh, pour l’assistance administrative; et Dr Maria Deloria Knoll, pour son apport critique sur l’analyse des données pendant la préparation de cet article. Soutien financier PneumoADIP de l’Université Johns Hopkins Le PneumoADIP est entièrement financé par l’Alliance GAVI et le Vaccine Fund et les gouvernements du Koweït, de Suède et de la République de Cet article a été publié dans le cadre d’un supplément intitulé «Surveillance et détection coordonnées des pneumococcies et des infections à Hib dans les pays en développement», parrainé par PneumoADIP de l’Alliance GAVI de Johns Hopkins Bloomberg School of Public Health, Baltimore, Maryland. a reçu des subventions de recherche de GlaxoSmithKline Biologicals, Sanofi-Aventis et Wyeth Vaccines PEK a reçu des subventions de recherche de GlaxoSmithKline Biologicals, Sanofi-Aventis et Wyeth Vaccines; a été consultant pour Wyeth Vaccines; et a été sur le bureau des conférenciers pour GlaxoSmithKline Biologicals et Wyeth Vaccines LJ a servi comme consultant et a reçu des subventions de recherche de GlaxoSmithKline Biologicals et Wyeth Vaccines Tous les autres auteurs: aucun conflit