La doxycycline mène à la stérilité et à l’élimination accrue des vers femelles d’Onchocerca volvulus dans une région où la microfilaridermie persiste après un traitement répété à l’ivermectine: un essai randomisé, contrôlé par placebo, à double insu

Contexte L’ivermectine IVM a été le médicament de choix pour le traitement de l’onchocercose Cependant, des cas de microfilaridermie persistante ont été signalés chez des personnes originaires d’une zone endémique au Ghana après plusieurs cycles d’IVM, suscitant des inquiétudes quant à une réponse suboptimale ou même l’émergence d’une pharmacorésistance. il est considéré comme risqué de continuer à se fier uniquement à l’IVM pour lutter contre ce phénomène, nous avons évalué l’effet de cibler les endosymbiotes d’Onchocerca volvulus Wolbachia avec la doxycycline pour ces patients avec une réponse suboptimale. Méthodologies Cent soixante-sept patients, la plupart avec plusieurs cycles d’IVM, ont été recrutés dans des zones avec réponse sous-optimale IVM et traités avec mg / jour doxycycline pendant des semaines Trois et mois après le traitement à la doxycycline, les patients ont participé au traitement IVM standardRésultats mois après traitement,% des vers femelles du groupe placebo étaient positifs Wolbachia, tandis que seulement% dans le groupe traité à la doxycycline contenait des a Conformément à l’interruption de l’embryogenèse, aucun des nodules prélevés chez les patients traités à la doxycycline ne contenait de microfilaires, et% de ces patients étaient sans microfilaridémie, contrairement aux patients sous placebo qui sont restés aux niveaux prétraitement P & lt; De plus, un nombre significativement augmenté de vers morts ont été observés après la doxycycline. Cibler le Wolbachia dans O volvulus est efficace pour éliminer les microfilaires dans la peau des patients atteints de l’onchocercose avec microfilaridémie persistante et dans la destruction des vers adultes après des traitements répétés de MIV standard. qui incluent la doxycycline pour lutter contre l’onchocercose dans les zones où les infections persistent malgré l’utilisation fréquente de l’enregistrement IVMClinical Trials ISRCTN

doxycycline, Onchocerca volvulus, réponse suboptimale, ivermectine, WolbachiaOnchocercose affecte & gt; Cette infection est causée par le nématode filarien Onchocerca volvulus, résidant dans des nodules sous-cutanés où ils produisent des millions de microfilaires Mf pendant leur durée de vie moyenne de plusieurs années Le Mf migre Le Programme Africain de Lutte contre l’Onchocercose APOC repose sur l’administration massive d’ivermectine IVM MDA Cependant, l’utilisation d’un seul médicament, dont plus d’un milliard de doses pourrait potentiellement être nécessaire pour l’élimination de la maladie , a soulevé des préoccupations que l’adaptation des parasites ou des hôtes , une réduction de l’efficacité du médicament, ou même la résistance aux médicaments pourrait se produire et entraver le succès des programmes de contrôle. nématodes , et des échecs thérapeutiques ont été suspectés chez d’autres helminthes humains In, suboptim La réponse SOR à l’IVM a été rapportée dans les populations endémiques de l’onchocercose dans les communautés de la région de Brong-Ahafo au Ghana avec une microfilaridémie significative malgré un antécédent de MDA avec IVM Cela indique un risque considérable de continuer à dépendre uniquement Interventions IVM Une meilleure intervention pourrait être une chimiothérapie conduisant à des effets adulticides ou stérilisants à long terme sur les vers, au mieux avec un médicament déjà enregistré et réutilisé. Récemment, notre groupe a développé des schémas macrofilaricides et stérilisants à long terme basés sur l’épuisement. de Wolbachia endosymbionts de O volvulus Nous avons démontré que la doxycycline administrée à raison de mg / jour pendant ou semaines conduit à un état complet et irréversible & gt; ans stérilisation des vers femelles adultes Il existe également un effet macrofilaricide qui peut être observé pour la première fois en mg / jour par semaine et qui semble plus prononcé lorsque la doxycycline est administrée en mg / j Doxycycline est un traitement antifilarien Plus efficace que le schéma MDA standard et disponible pour traiter des patients individuels Pour prouver formellement la pertinence de la doxycycline dans les zones où la MDA avec IVM montre une performance sous-optimale, nous avons réalisé une étude randomisée en double aveugle contrôlée par placebo avec mg / jour doxycycline administrée pendant des semaines aux patients atteints d’onchocercose dans une zone avec plusieurs cycles documentés de traitement IVM

Méthodes

Population et aire d’étude, admissibilité du sujet et sélection

L’étude a été entreprise dans des communautés endémiques de l’onchocercose situées le long des bassins des rivières Pru, Basse-Volta Noire et Tain dans la région de Brong-Ahafo au Ghana et comprend des communautés où le SOR IVM a été signalé. Recherche, publications et éthique de l’École des Sciences Médicales de l’Université Kwame Nkrumah de Science et Technologie, Kumasi, Ghana, et est enregistrée à Current Controlled Trials wwwisrctncom, identifiant Les volontaires ont été sélectionnés en utilisant les carnets d’inscription du Programme de Lutte contre l’Onchocercose sélectionner ceux ayant des microfilaires dans la peau malgré de multiples traitements antérieurs, et / ou la réapparition de nodules palpables Les volontaires éligibles ont pris en moyenne des cycles de MIV et le% des participants à l ‘étude ont reçu ≥ des rondes. & gt; Les fonctions hépatique et rénale ainsi que les tests de grossesse ont été évalués par la méthode de la bandelette réactive utilisant du sang veineux et de l’urine. Des biopsies cutanées ont été effectuées pour déterminer les charges microfilariennes cutanées. Les critères d’exclusion étaient hépatiques et hépatiques anormaux. enzymes rénales, grossesse, allaitement, intolérance à la doxycycline, abus d’alcool ou de drogue, antécédents de tuberculose, glucose dans l’urine, hypertension, ou antécédents de tout état nécessitant des médicaments à long terme voir aussi registre ISRCTN

Tableau Données de base du patient Caractéristique Traitement Doxycycline Placebo P Valeur Nombre de patients Age, y P = a Moyenne ± ET ± ± Poids, kg P = a Moyenne ± ET ± ± Sexe, Non P = b Femme%% Homme%% IVM tours P = c Moyenne ± écart-type ± ± min-max – – Th, percentiles médians,, Nombre d’arrondis%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %% Nombre de nodules palpés P = c Total Non Moyenne ± SD ± ± Médiane Nombre de sites palpés P = c Total Non Moyenne ± SD ± ± Médiane Caractéristique Traitement Doxycycline Placebo P Valeur Nombre de patients Âge, y P = a Moyenne ± écart-type ± ± Poids , kg P = a Moyenne ± SD ± ± Sexe, Non P = b Femme%% Mâle%% IVM ronde P = c Moyenne ± SD ± ± Min-Max – – Th médiane, e percentiles,, Nombre de tours%%% %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% Nombre de nodules palpés P = c Total Non Moyenne ± écart-type ± ± Médiane Nombre de sites palpés P = c Total Aucune moyenne ± écart-type ± médiane Abréviations: IVM, ivermectine; SD, écart-type Student t testb Test exact de Fisher Mann-Whitney U testView Large

Conception d’étude, randomisation et interventions

L’objectif principal de cet essai randomisé, contrôlé par placebo et en double aveugle était d’évaluer l’effet macrofilaricide ou stérilisant de la doxycycline sur les vers adultes du volvulus femelle O La taille de l’échantillon a été calculée en fonction de la proportion de vers volvulus femelles O Traitement à la doxycycline En supposant un taux de% de patients avec des vers femelles morts dans le groupe placebo et un taux de% dans le groupe doxycycline, le test exact de Fisher au niveau de α =% avait une puissance d’au moins% avec un échantillon de patients par groupe d’étude En permettant un taux d’abandon de%, le nombre total de patients par groupe de traitement était des individus Pour assurer une distribution égale des individus Mf-positifs et Mf-négatifs aux groupes de traitement, les patients éligibles ont été randomisés séparément selon à leur statut Mf par une séquence d’attribution aléatoire générée par ordinateurParticipants ont reçu mg doxycycline Doxydoc ou placebo correspondant par jour pendant des semaines sous observation quotidienne Après la fin du traitement, la doxycycline a été administrée à tous les participants du groupe placebo et aux patients Mf-positifs du groupe de la doxycycline.

Cartographie des nodules

Les nodules palpables ont été cartographiés à l’entrée de l’étude et quelques mois avant l’opération; les emplacements ont été assignés à une tête de système normalisée, épaule, thorax, crête iliaque, trochanter, os sacrum, genoux À mois, tous les nodules palpables ont été enlevés des patients disponibles

Procédures de laboratoire

La peau de Mf a été évaluée avant et pendant et mois après le début du traitement. Deux biopsies cutanées de – mg ont été prélevées des fesses et préparées pour un examen microscopique, comme décrit précédemment Nodules ont été fixés dans% éthanol et inclus dans la paraffine hématoxyline et éosine ou méthode Gomori pour le fer, ou immunocolorée contre Dirofilaria immitis Wolbachia protéine de surface Diwsp et cathepsine D-like lysosomal aspartique protéase de O volvulus Au moins sections à travers les nodules ont été évalués histologiquement Worms qui avaient été acquis après le traitement selon le la définition décrite précédemment a été soustraite de toutes les analyses Les vers ont été classés comme nouvellement acquis, jeunes, d’âge moyen ou vieux Les sections ont été évaluées indépendamment par des parasitologistes expérimentés SS, MDP

Méthodes statistiques

Les différences entre les groupes de traitement ont été analysées avec le test t de Student pour paramétriques quantitatives et le test U de Mann-Whitney pour toutes les autres variables non paramétriques. Le test exact de Fisher a été utilisé pour comparer les variables qualitatives binaires et la corrélation de rang de Spearman pour les comparaisons. Les résultats histologiques ont été testés sur un seul ver et sur les patients en utilisant le test U de Mann-Whitney pour le test quantitatif et le test exact de Fisher pour les données qualitatives. En outre, des analyses de régression ont été effectuées en utilisant une régression logistique alternée, comme mis en œuvre dans la procédure SAS Genmod Cette procédure permet de tester une dépendance potentielle entre les vers dans le patient Quatre ensembles de données par protocole [PP]; intention de traiter [ITT]; traitement-PP; traitement et IVM-PP ont été utilisés pour analyser les données et sont expliqués dans les tableaux pertinents Les analyses ont été effectuées à l’aide de SPSS IBM SPSS Statistics; Version d’Armonk, New York et SAS SAS Institute Inc, Cary, Caroline du Nord

RÉSULTATS

Flux des participants et réactions indésirables

Le profil d’essai de l’étude est illustré en Figure supplémentaire En tout, les volontaires ont été enrôlés et ensuite randomisés dans les bras de traitement Les données de référence sont données dans le tableau. la positivité de Mf P =; ITT mais aussi l’intensité de microfilaridermie Mf / mg peau; P =; La Doxycycline a été bien tolérée, avec seulement des effets indésirables bénins. AR Tableau 20 Vingt patients traités par doxycycline, un placebo n’ayant pas complété le traitement. Onze patients la doxycycline, un placebo a été abandonné parce qu’il a signalé des EI, comme la diarrhée et les vomissements, que les médecins aveugles au code ne pouvaient pas exclure d’être potentiellement liés à la prise de médicaments; toutes les autres raisons de l’inachèvement ont été rapportées comme non liées au médicament Il n’y avait pas de différence significative dans le nombre de RA ou dans les types de RA entre les groupes de traitement, sauf pour la nausée, une AR commune due à l’absorption de doxycycline

Réduction soutenue des charges cutanées microfilariennes dans le groupe Doxycycline

Au départ, il n’y avait pas de différence significative dans la charge microfilarienne médiane Mf / mg peau entre les groupes de traitement Tableau, toutes les cohortes Cependant, au mois, une différence significative est apparue P & lt; , avec le groupe doxycycline montrant des médianes de, tandis que les médianes du groupe placebo ont augmenté dans toutes les cohortes. Cette différence a été maintenue plusieurs mois après le traitement P & lt;

Tableau Densités microfilariennes Temps d’étude ITT n = Traitement-PP n = Traitement et-IVM-PP n = Doxycycline Placebo Doxycycline Placebo Doxycycline Placebo Baseline Mf positif /% /% /% /% /% /% P valueb P = P = P = Moyenne ± écart-type ± ± ± ± ± ± GMc Min-Max – – – – – – Th, percentiles médians,,,,,, P évalués P = P = P = mo Mf positif /% /% /% /% /% /% P valeurb P & lt; P & lt; P & lt; Moyenne ± SD ± ± ± ± ± GMc Min-Max – – – – – – Th, percentiles médians,,,,,, P évalués P & lt; P & lt; P & lt; Mo Mf positif /% /% /% /% /% /% P valeurb P & lt; P & lt; P & lt; Moyenne ± SD ± ± ± ± ± GMc Min-Max – – – – – – Th, percentiles médians,,,,,, P évalués P & lt; P & lt; P & lt; Persistante Mf positif /% /% /% /% /% /% Temps d’étude ITT n = Traitement-PP n = Traitement et-IVM-PP n = Doxycycline Placebo Doxycycline Placebo Doxycycline Placebo Baseline Mf positif /% /% /% / % /% /% P valeurb P = P = P = Moyenne ± écart-type ± ± ± ± ± ± GMc Min-Max – – – – – – Th, percentiles médians,,,,,, P valeur P = P = P = Mo Mf positif /% /% /% /% /% /% P valeurb P & lt; P & lt; P & lt; Moyenne ± SD ± ± ± ± ± GMc Min-Max – – – – – – Th, percentiles médians,,,,,, P évalués P & lt; P & lt; P & lt; Mo Mf positif /% /% /% /% /% /% P valeurb P & lt; P & lt; P & lt; Moyenne ± SD ± ± ± ± ± GMc Min-Max – – – – – – Th, percentiles médians,,,,,, P évalués P & lt; P & lt; P & lt; Persistante Mf positive /% /% /% /% /% /% Abréviations: GM, moyenne géométrique; ITT, intention de traiter; IVM, ivermectine; Mf, microfilaires; PP, par protocole; SD, standard deviationa L’ensemble ITT inclut tous les patients qui ont reçu les médicaments de l’étude pendant au moins une journée. L’ensemble Treatment-PP comprend toutes les personnes qui ont suivi le traitement selon le protocole et une autre série a été créée. dans les deux tours d’administration de médicament de masse entre le traitement et les mois de suivi Traitement et IVM-PPb Test exact de Fisher Le GM a été calculé en ajoutant à toutes les valeurs et après le calcul a été de nouveau soustrait du résultat Mann-Whitney U teste qui étaient constamment positifs sur tous les points temporels. Voyez grand. Parmi les participants à l’étude qui ont terminé le traitement PP et reçu des séries d’IVM au cours du traitement d’essai et d’IVM-PP,% étaient Mf positifs microfilaridermiques à l’entrée à l’étude. En effet, seul le pourcentage d’individus du groupe traité par la doxycycline est resté microfilaridermique, indiquant une chute significative après traitement. patients% dans le groupe placebo sont restés Mf-positifs malgré un cycle supplémentaire de M & P P & lt; Fait important, même après des cycles supplémentaires d’IVM au mois de suivi,% des patients du groupe placebo étaient toujours Mf positifs Dans l’ensemble de données ITT, quelques patients de plus dans le groupe traité par la doxycycline restaient microfilaridermiques, ce qui correspond au fait Le traitement par la doxycycline ne s’est pas terminé Il est intéressant de noter que les patients étaient toujours positifs après des mois dans les données PP, alors que ce nombre diminuait après plusieurs mois, ce qui correspond à un blocage de la production embryonnaire. En résumé, les données Mf reflètent la stérilisation à long terme de O volvulus après traitement à la doxycycline, tandis que la fertilité des vers femelles n’a pas été réduite chez les patients sous placebo. Les résultats du groupe placebo sont particulièrement préoccupants. toujours resté prévalent dans ce groupe

La doxycycline inhibe l’embryogenèse et possède une activité macrofilaricide

Toutes les analyses histologiques ont été réalisées conformément à l’analyse PP, c’est-à-dire que seules les personnes ayant suivi un traitement par doxycycline / placebo et ayant suivi le traitement de suivi de mois ont été classées comme ayant beaucoup, peu ou pas de Tableau Wolbachia précédemment Quatre-vingt pour cent des vers femelles dans le groupe placebo étaient Wolbachia positifs peu et beaucoup, alors que seulement% contenait Wolbachia dans le groupe traité à la doxycycline P & lt; Une différence similaire a été observée pour les vers mâles

Tableau Effet du traitement à la doxycycline sur la présence de Wolbachia dans le groupe de traitement Worms Nombre de patients / Nodulesa Nombre de Wormsb femelles vivants Pas de Wormsb vivants mâles Allc Avec Wolbachiad Allc Avec Wolbachiad Beaucoup peu Peu nombreux Peu Peu Doxycycline wk / Placebo / Groupe de traitement Temps, mois Nombre de Patients / Nodulesa Nombre de Patients Vivants Wormsb Nombre de Patients Vivant Wormsb Allc Avec Wolbachiad Allc Avec Wolbachiad Beaucoup Peu Quelques Aucun Beaucoup Peu Doxycycline wk / Placebo / a Seuls les patients / nodules évaluables sont inclus; les nodules avec les vers nouvellement acquis seulement sont soustraits. Les vers nouvellement acquis ont été soustraits à la doxycycline, n = femelles; placebo, n = femalesc Bien que le nombre de vers vivants soit donné pour rendre les nombres cohérents avec ceux des autres tables, il n’a pas été possible de distinguer si le ver avait beaucoup, peu ou pas de Wolbachia, en raison d’un trop petit ver matériel dans les sections histologiques respectives Par conséquent, “Tous” n’est pas toujours un résumé des catégoriesd Différence significative entre la doxycycline et le groupe placebo en ce qui concerne l’absence de Wolbachia bP & lt; Nous avons constaté que, selon notre étude antérieure ,% des vers femelles du groupe placebo avaient normalement développé des embryons au bout de quelques mois, et Mf ont été observés en% des femelles. Par contraste, seuls% des vers femelles du groupe doxycycline présentaient une embryogenèse normale, et aucun des nodules n’était Mf positif En plus de l’inhibition de l’embryogenèse, nous avons également observé une réduction significative de l’insémination des vers femelles dans ce cas. table de groupe

Tableau Effet du traitement par la doxycycline sur le groupe traité par l’embryogenèse Temps, nbre de patients / Nodulesa Nombre de femelles vivantes Nbre de nodules Tous les spermatozoïdes embryonnaires utérins Tous avec intacte Microfilariae non jugée Utérus vide, ovocytes Dégénérescence dégénérée normale seulement wk / Placebo / Groupe traité Temps, mois Nombre de patients / Nodulesa Nombre de femelles vivantes Wormsb Nombre de nodules Tous les spermatozoïdes embryonnaires de l’utérus Tous avec microfilaires intacts Non jugés Utérus vides, ovocytes seulement normaux Doxycycline dégénérée wk / Placebo / a Seuls les patients / nodules évaluables sont inclus; les nodules avec les vers nouvellement acquis seulement sont soustraits. Les vers nouvellement acquis ont été soustraits à la doxycycline, n = femelles; placebo, n = femellesc Différence significative entre la doxycycline et le groupe placebo en ce qui concerne la présence d’embryogenèse normale vs dégénérée P & lt; , Test exact de Fisher Différence significative entre la doxycycline et le groupe placebo en ce qui concerne le nombre de vers trouvés avec des spermatozoïdes dans l’utérus P & lt; , Fisher exact teste Différence significative entre la doxycycline et le groupe placebo en ce qui concerne la proportion de nodules avec des microfilaires intactes P & lt; , Test exact de FisherView Large Le groupe doxycycline a montré une augmentation significative des vers femelles morts à des mois par rapport au groupe placebo Tableau; P & lt; Une tendance vers un pourcentage plus élevé de mâles morts dans le groupe traité à la doxycycline a également été observée P =; la variabilité peut être due à l’observation que les mâles morts sont plus rapidement absorbés que les femelles Le profil d’âge de la population de vers n’a pas révélé de différences significatives entre les groupes de traitement.

Tableau Effet macrofilaricide du groupe traité par la doxycycline Temps de traitement, nbre de patients / Nodulesa Nbre de femelles Wormsb Nbre de femelles Wormsb Toutes les femelles mortes% Tous les mâles morts% Doxycycline wk /%% Placebo /%% Groupe de traitement Temps, nbre de patients / Nodulesa Nombre de femelles Wormsb Nombre de femelles Wormsb Toutes les femelles mortes% Tous les mâles morts% Doxycycline wk /%% Placebo /%% a Seuls les patients / nodules évaluables sont inclus; les nodules avec les vers nouvellement acquis seulement ont été soustraits. Les vers nouvellement acquis ont été soustraits à la doxycycline, n = femelles; placebo, n = femellesc Différence significative entre la doxycycline et le groupe placebo en ce qui concerne la proportion de vers femelles mortes P & lt; , Test exact de FisherVoir en grand

Tableau Type d’âge du groupe de traitement Wormsa Temps, mois Nombre de patients / Nodulesb Nombre de vers femelles vivants Nombre de vers mâles vivants Tous les âges Âge Allc Nouvellement acquis Jeune Moyen Âge Nouvellement acquis Jeune Moyen Âge Doxycycline w / Placebo / Groupe de traitement Durée, mois Non Nombre de patients / Nodulesb Nombre de vers femelles vivants Nombre de vers mâles vivants Tous âges Âge Age nouvellement acquis Jeune moyen Ancien Nouvellement acquis Jeune Moyen Âge Doxycycline wk / Placebo / a Les caractéristiques de l’âge d’un ver comprenaient la perte de l’intégrité de la paroi, la perte de noyaux de tous les organes, et absence de protéase aspartique APR coloration Très vers dégénérés, toujours APR positifs, ont été classés comme moribonds et regroupés dans la catégorie “morts” Les vers les plus âgés étaient plus grands et présentent des tissus dégénérés Gomori fer montre que les vers accumulent plus de fer avec l’âge croissant, d’abord dans l’intestin et plus tard dans d’autres organes En utilisant un anticorps contre la protease aspartique lysosomale O volvulus, l’intestin des jeunes vers était peu marqué, alors qu’il était plus fort chez les vers plus âgés, accompagné de coloration supplémentaire de l’hypoderme et de l’épithélium. dans le nodule ont été utilisés pour discriminer les vers nouvellement acquis b Seuls les patients / nodules évaluables sont inclus Contrairement aux tableaux, les vers nouvellement acquis sont inclus. Chez les vers mâles, il n’a pas été possible de distinguer le type d’âge du ver dans le Par conséquent, “Tout” n’est pas toujours un résumé des catégories. Le tableau montre les nombres moyens de sites et de nodules, palpés à l’entrée de l’étude et les mois précédant la nodulectomie, ainsi que les nodules réellement ectomisés et évalués. réduction du nombre de nodules palpés dans le groupe doxycycline au cours de la période d’observation par rapport au groupe placebo P = Ces données suggèrent que les vers morts sont absorbés au cours du temps et que l’effet macrofilaricide de la doxycycline peut même avoir été plus important que celui détecté par l’histologie

Tableau Nodules palpés, opérés et évalués Temps de l’étude Nombre de Nodules Nombre de sites Doxycycline Placebo Doxycycline Placebo Référence Nombre de patients Total Nombre de nodules / sites Moyenne ± écart-type ± ± ± ± Min-Max – – – – percentiles,,, P valeurb P = P = mo Nombre de patients Total Nombre de nodules / sites Moyenne ± écart-type ± ± ± ± Min-Max – – – – Th médian, percentiles,,, P valeurb P = P = Différence mo – ligne de base Nombre de patients Moyenne ± SD – ± – ± – ± ± Min-Max – to – to – to Médian th, th centiles -,,, P valeurb P = P = Operatedc Nombre de patients Total Nombre de nodules / sites Moyenne ± SD ± ± ± ± Min-Max – – – – Me dian th, percentiles,,,, P valeurb P = P = ÉvaluéN Nombre de patients Total Nombre de nodules / sites Moyenne ± écart-type ± ± ± ± Min-Max – – – – Médian th, th percentiles,,,, P valueb P = P = Temps d’étude Point Nombre de nodules Nombre de sites Doxycycline Placebo Doxycycline Placebo Baseline Nombre de patients Total Nombre de nodules / sites Moyenne ± écart-type ± ± ± ± Min-Max – – – – Médian th, th percentiles,,,, P valeurb P = P = mo Nombre de patients Total Nombre de nodules / sites Moyenne ± SD ± ± ± ± Min-Max – – – – Th, percentiles médians,,,, P valeurb P = P = Différence mo – référence Non des patients Moyenne ± SD – ± – ± – ± ± Min-Max – to – to – to – à Médiane th, percentiles -,,,, P valeurb P = P = Operatedc Nombre de patients Total Nombre de nodules / sites Moyenne ± SD ± ± ± ± Min-Max – – – – Médian th, th percentiles,,, , P valeurb P = P = évalué No de patients Total Nombre de nodules / sites Moyenne ± écart-type ± ± ± ± Min-Max – – – – Th, percentiles médians,,,, P valeurb P = P = Abréviation: SD, standard deviationa L’ensemble utilisé ici Traitement-per protocole inclut toutes les personnes qui ont pris le doxycycline ou le placebo selon le protocoleb Test de Mann-Whitney U Chez les participants, aucun nodule n’a été trouvé avant ou après l’incision Treize participants et, au total,% n = de tous les nodules n’ont pas pu être analysés pour le statut parasitaire; les raisons de cette exclusion incluaient une calcification importante du nodule, ou une origine non-occlusale, par exemple, des granulomes de corps étrangers, des lipomes ou des ganglions lymphatiques. Des nodules supplémentaires ont été soustraits pour contenir des vers nouvellement acquis.

Analyses statistiques supplémentaires

En plus de l’analyse PP, nous avons réanalysé les données en utilisant l’ensemble de données ITT. Le tableau montre en résumé que même dans les conditions ITT, tous les paramètres comparés étaient encore significatifs, que ce soit au niveau du ver lui-même ou du total somme des vers présents par patient Les détails sur l’ensemble de données ITT pour la présence de Wolbachia, l’embryogenèse et l’élimination des vers peuvent être trouvés dans les tableaux supplémentaires –

Tableau Analyse statistique supplémentairea par patientb par analyse de régression par vortex unique Facteur répété: Patient PP ITT PP ITT PP ITT Femelles mortes P = P = P & lt; P = P = P = OR = OR = OR = OR = femelles vivantes P = P = P & lt; P = P = P = OR = OR = OR = OR = Beaucoup de bactéries vs pas de bactéries P & lt; P & lt; P & lt; P & lt; P & lt; P & lt; OR = OR = OR = OR = Peu de bactéries vs pas de bactéries P & lt; P & lt; P & lt; P & lt; P & lt; P & lt; OR = OR = OR = OR = Aucune bactérie vs peu de bactéries

DISCUSSION

L’utilisation de la doxycycline répond à ces critères pour les situations et pour l’onchocercose. Dans les situations où les activités macrofilaricides et stérilisantes à long terme de la doxycycline en font un choix thérapeutique pour le traitement individuel, différent de celui de l’IVM. être répété pendant des années jusqu’à ce que les vers adultes aient arrêté l’embryogenèse La recommandation de traitement ici a été d’administrer le cours de doxycycline suivi d’un cycle d’IVM, pour combiner les effets stérilisants et meurtriers de la doxycycline sur les vers femelles avec la mort rapide Mf par IVM En situation, un consensus récent est d’identifier les zones avec une probabilité pour les individus co-infectés avec des comptes élevés pour L loa Mf, puis de tester, par exemple, avec la microscopie cellulaire tous les individus dans ces zones et exclure ceux avec & gt ; Mf / mL du traitement IVM Cependant, ces personnes peuvent être traitées sans danger avec la doxycycline pour tuer leurs parasites O volvulus, car L loa ne contient pas Wolbachia. Lors de leur réunion annuelle à Brazzaville, le Joint Action Forum, le conseil d’administration d’APOC, a adopté l’utilisation de la doxycycline pour le traitement des patients individuels http: // wwwwhoint / apoc / Journal_ENGLISH_Day__FINAL_redpdfLa présente étude fournit une preuve formelle que la doxycycline, administrée au mg / jour pendant des semaines, convient également à la situation, dans les zones avec SOR. moins de mois, alors que le groupe placebo n’a pas nettoyé la peau Mf même après avoir reçu des doses supplémentaires d’IVM; Ce dernier groupe est typique du SOR à IVM observé précédemment [,,,] Des études précédentes dans notre zone d’étude ont suggéré que la présence de vers femelles fertiles – mois après le dernier des tours au moins de IVM est incompatible avec une réponse normale à IVM [,,,] Les résultats du groupe placebo dans notre étude soulignent cela plus loin, tandis que le régime doxycycline offre une approche «prête à l’emploi» sûre pour les vers volvulus soupçonnés de présenter des essais communautaires SOR à IVM dans notre zone d’étude étudient actuellement l’impact d’une stratégie test-and-treat, en utilisant la doxycycline dans les communautés où SOR à IVM a été observée. La doxycycline n’a pas provoqué un niveau différent d’AR par rapport au groupe placebo. Par opposition à la seule sur macrofilaricide connue. la toxicité de la doxycycline est probablement due à son effet relativement lent sur les vers, entraînant une mort prolongée après plus d’un an , assurant que l’hôte est capable de gérer les événements survenant au cours de la mise à mort des adultes; Par conséquent, des effets indésirables sévères ne se manifestent pas. L’action macrofilaricide lente du médicament soulève toutefois un problème de surveillance dans les essais cliniques s’ils ont lieu dans des zones endémiques. Bien qu’une activité macrofilaricide en% de la doxycycline soit probablement obtenue, go , cela ne peut pas être directement observé dans les essais car avec des périodes d’observation & gt; années, il y a interférence confondante de nouveaux vers dans des zones géographiques telles que notre site d’étude, où la transmission de l’infection n’a pas encore été interrompue Dans le présent essai, la proportion de vers morts analysés dans les nodules disponibles après doxycycline était% PP Une dose quotidienne de “seulement” mg / jour par opposition à mg / jour ne représente probablement pas un nombre inférieur de vers morts, car de nouvelles données de modélisation suggèrent que quelle que soit la dose quotidienne, la durée de vie moyenne d’un ver est De plus, le taux macrofilaricide réel était probablement plus élevé car nous avons observé une perte de nodules entre le prétraitement et des mois dans le groupe doxycycline. Dans ce tableau de groupe, avec une moyenne d’environ un ver femelle par nombre de nodules, il faudrait inclure environ plus de vers femelles mortes au nombre de morts, ce qui augmente le ratio Il est intéressant de noter que la taille des nodules d’Onchocerca ochengi est significativement réduite après traitement à la tétracycline chez les bovins et indique l’absorption des nodules La cause ultime de la SOR à IVM est encore inconnue Bien que la sélection des gènes de résistance ait Les preuves de la sélection des allèles pourraient en effet être documentées à partir de vers de notre zone d’étude, il existe d’autres mécanismes potentiels, tels que l’adaptation de la biologie des vers, par exemple le changement des niveaux de transcription par opposition aux mutations génétiques. Dans ce sens, nous avons observé que le niveau de TGF-β détectable dans les cellules hôtes autour des vers femelles dans les nodules est associé aux cycles de la MIV Si ces données préliminaires valent pour d’autres domaines, ce type de SOR peut devenir beaucoup plus fréquemment observé et nécessitera des approches thérapeutiques adéquates, telles que tuer des vers adultes ou les stériliser de façon permanente. Cette étude montre que traitement à la doxycycline répond à ces exigences

Remarques

Remerciements Nous remercions le Dr Claudio Bandi, Université de Milan, Italie, pour avoir fourni des anticorps anti-protéines de surface Wolbachia. Nous sommes reconnaissants aux volontaires d’avoir participé à cette étude. Soutien financier Cette étude a reçu un financement important de la Commission européenne. Bourse d’études Academic Service AH est membre du Centre Allemand de Recherche sur les Infections et du cluster d’excellence “ImmunoSensation” DFG: EXC Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: Aucun conflit d’intérêt potentiel Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêt potentiels Les conflits que les éditeurs jugent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués