Fièvre hémorragique mortelle causée par le virus du Nil occidental aux États-Unis

Contexte La plupart des infections à VNO par le virus du Nil occidental chez les humains sont asymptomatiques; une maladie grave survient chez un nombre relativement faible de patients et se manifeste typiquement par une encéphalite, une méningite ou une paralysie flasque aiguë. Quelques cas de maladie potentiellement mortelle avec des manifestations hémorragiques diffuses ont été rapportés en Afrique; cependant, cette présentation clinique n’a été documentée pour aucun des cas de maladie du VNO signalés aux États-Unis pendant – Nous décrivons un cas d’infection au VNO fulminant chez un homme de Floride âgé de plus de 13 ans qui est décédé après une brève maladie Les tests diagnostiques traditionnels et contemporains, y compris l’isolement en culture, l’examen au microscope électronique, l’amplification en chaîne par polymérase inverse-transcriptase et les colorations immunohistochimiques, ont été utilisés pour confirmer l’infection systémique par le VNO chez le patient obtenir la description. L’examen au microscope électronique a identifié l’isolat comme un flavivirus, et la réaction en chaîne de la polymérase inverse a amplifié des séquences de WNV spécifiques de l’isolat et du tissu du patient. Chaîne de polymérase quantitative réaction identifiée approximative Des copies virales / ml dans le sérum du patient ont été détectées par des colorants immunohistochimiques dans les cellules mononucléaires intravasculaires et l’endothélium dans la peau, les poumons, le foie, les reins, la rate, la moelle osseuse et le système nerveux central; Bien que les maladies hémorragiques soient une manifestation rare de l’infection par le VNO, les découvertes fournies par ce rapport peuvent offrir de nouvelles perspectives concernant le spectre clinique et la pathogenèse de la maladie du VNO chez l’homme.

Le virus du Nil occidental, cause de la fièvre du Nil occidental et de l’encéphalomyélite du Nil occidental, est un flavivirus antigéniquement similaire au virus de l’encéphalite japonaise, le virus de l’encéphalite de St Louis et le virus de l’encéphalite de Murray Valley. qui causent des fièvres hémorragiques, y compris le virus de la dengue, le virus de la fièvre jaune, le virus de la maladie de Kyasanur et le virus de la fièvre hémorragique d’Omsk. La plupart des infections à VNO chez les humains sont asymptomatiques; Les cas les plus fréquents d’encéphalite, de méningite ou de paralysie flasque aiguë Des cas rares de maladie hémorragique sévère ou mortelle avec coagulopathie, hépatite fulminante et hémorragie spontanée ont été rapportés en Afrique centrale. République et Afrique du Sud Au cours de -, un total de cas de maladie du VNO, y compris des cas de fièvre du Nil occidental, des cas de maladie neuroinvasive et des décès, ont été signalés aux États-Unis ; cependant, la fièvre hémorragique causée par le VNO n’a pas été documentée auparavant dans l’hémisphère occidental

Rapport de cas

Un patient âgé d’un an, déjà en bonne santé, s’est présenté dans un service d’urgence du centre de la Floride en juillet avec hypotension sévère, acidose métabolique et insuffisance rénale aiguë. Le patient était rentré plusieurs jours plus tôt d’un voyage en bateau dans le sud de la Floride. Okeechobee et diverses voies navigables intérieures Pendant ce voyage, il a reçu de nombreuses piqûres de moustiques et, le dernier jour, il a signalé fatigue, malaise et faiblesse. Le lendemain, il a eu des frissons, des nausées, des vomissements et de l’urine foncée. selles striées Le patient était pépiniériste et était revenu plusieurs jours avant l’admission à l’hôpital après un voyage d’affaires dans une ferme près de San José, au Costa Rica; Il avait fréquemment voyagé au cours des années précédentes. Son histoire médicale incluait le diabète sucré non insulino-dépendant, l’hypertriglycéridémie et l’hypertension. L’examen physique révélait un homme alerte et anxieux avec une peau froide et pâle. Sa température était de ° C, son pouls était de sa fréquence respiratoire était de 1 / min. Sa pression artérielle était de / mm Hg De petites pétéchies étaient présentes sur ses membres inférieurs et ses bras supérieurs. Des ecchymoses diffuses étaient présentes sur son abdomen et ses cuisses. Sa numération leucocytaire était x cellules / mm% métamyélocytes,% ,% de neutrophiles segmentés,% de lymphocytes et% de monocytes, son taux d’hémoglobine était de g / dL, son taux d’hématocrite était, et sa numération plaquettaire était de * plaquettes / mm Sa concentration de fibrine D-dimères était élevée à & gt; μg / dL, son temps de prothrombine a été augmenté à s, et son temps de céphaline activée a été augmenté à sec. D’autres valeurs de laboratoire comprenaient un faible taux de bicarbonate mmol / L; des taux élevés d’azote uréique sanguin mg / dL, de créatinine mg / dL, de lactate déshydrogénase U / L, d’aspartate aminotransférase U / L, d’alanine aminotransférase U / L, de phosphatase alcaline U / L et de biliburine totale mg / dL; un niveau de protéine total normal g / dL avec un faible taux d’albumine g / dL; un faible niveau de magnésium mg / dL, un niveau normal d’acide lactique mmol / L, et une créatine kinase MB niveau d’isoenzyme μg / L Son urine contenue – leucocytes et – RBCs par champ de forte puissanceLe patient a été admis dans une unité de soins intensifs avec un Les hémocultures de routine n’ont montré aucune croissance de pathogènes bactériens En raison de préoccupations au sujet des bactéries potentiellement fastidieuses ou non cultivables, la couverture antibiotique du patient a été élargie pour inclure la doxycycline, le céfipèmè, la vancomycine Purpura palpable diffus du dos et des membres inférieurs Un spécimen de biopsie percutanée a montré une hémorragie dermique et des thrombi de fibrine Essais de l’antigène de surface du virus de l’hépatite B et des anticorps réactifs aux virus de l’hépatite A et C, Rickettsia rickettsii, Rickettsia typhi, Les espèces de Leptospira, et Coxiella burnetii étaient négatives Son niveau de complément de sérum C était légèrement exprimé en mg / dL, et le niveau de C était nettement diminué à & lt; mg / dL L’insuffisance rénale du patient s’est aggravée et ses taux d’azote uréique et de créatinine ont augmenté à mg / dL et mg / dL, respectivement. Il est resté sévèrement hypotenseur et acidotique et est décédé après l’admission Des échantillons de sérum et de biopsie ont été envoyés aux centres pour le contrôle et la prévention des maladies pour l’évaluation diagnostique

Méthodes

Sérologie Un échantillon de sérum a été testé pour les anticorps IgG contre R rickettsii, R typhi, Ehrlichia chaffeensis et Anaplasma phagocytophilum en utilisant un test d’immunofluorescence indirecte avec une IgG de chèvre anti-IgG humaine conjuguée à l’isothiocyanate de fluorescéine Kirkegaard et Perry Laboratories à une dilution de: L’examen histopathologique et immunohistochimique a été réalisé à partir d’une lésion cutanée purpurique et bissectée; La section a été conservée pour l’isolement de la culture cellulaire et l’autre a été placée dans du formol tamponné pour l’évaluation histologique. Des coupes de μm ont été colorées avec de l’hématoxyline-éosine et testées pour la rickettsie de la fièvre pourprée, Neisseria meningitidis et diverses flavivirus utilisant une technique de phosphatase immunoalcaline Les anticorps primaires comprenaient l’anticorps anti-R rickettsii de lapin à une dilution de:; anticorps anti-N meningitidis sérogroupe Y de cheval à une dilution de:; virus de l’encéphalite anti-japonaise du virus polyclonal de la souris, liquide ascitique largement réactif avec divers flavivirus, y compris le virus de l’encéphalite japonaise, le virus de l’encéphalite de St Louis, le VNO, le DENV et le YFV, à une dilution de:; un liquide ascitique anti-YFV de souris polyclonale spécifique du YFV, à une dilution de:, un sérotype anti-DENV de souris polyclonale, liquide ascitique largement réactif avec divers flavivirus, y compris les sérotypes du virus DENV – et le VNO, à une dilution de; et des anticorps monoclonaux anti-WNV regroupés clones H et A, spécifiquement réactifs avec le WNV, chacun à une dilution de: Culture cellulaire Une partie de l’échantillon de biopsie cutanée a été triturée dans du milieu RPMIGibco Invitrogen L’homogénat a été transféré aux cellules Vero E dans un cm ballon de culture cellulaire en polystyrène et recouvert de mL de milieu de culture cellulaire contenant U / mL de pénicilline G, μg / mL de sulfate de streptomycine μg / mL d’amphotéricine B et incubé à ° C dans une atmosphère enrichie en CO% Après jours, la culture cellulaire le milieu a été remplacé par un milieu sans antibiotique. Ce milieu a été remplacé chaque semaine, et le surnageant de culture cellulaire a été passé aux cellules fraîches lorsque des changements cytopathiques de la monocouche ont été observés; les cultures cellulaires ont ensuite été évaluées par microscopie électronique, immunohistochimie, et analyses moléculaires. Microscopie électronique Les cellules Vero E infectées ont été fixées à température ambiante avec du glutaraldéhyde en% dans un tampon phosphate mol / L, grattées dans le ballon et recueillies par centrifugation. heure supplémentaire, postfixé pendant min avec du tétroxyde d’osmium tamponné%, déshydraté dans une série de concentrations d’éthanol gradué et d’oxyde de propylène, et incorporé dans un mélange Epon substitut-Araldite. Analyses moléculaires L’ADN a été extrait d’une portion de peau triturée utilisée comme inoculum primaire pour la culture cellulaire. L’extrait a été évalué à l’aide d’un test de PCR nichée ciblant le gène htr de l’antigène commun des rickettsies -kDa. L’ARN a été extrait des coupes de section III de la peau fixée au formol et incluse dans de la paraffine. Kit Ambion, et à partir de cellules Vero E infectées par le formol, à l’aide du kit RNeasy Mini Kit Qiag Les tests de RT-PCR ont été réalisés avec le kit RT-PCR en une étape Promega en utilisant des amorces publiées pour le WNV et le DENV Tous les échantillons ont été testés en utilisant un test de RT-PCR hémi-nested spécifique du flavivirus ciblant le gène NS [, ] et WNV-spécifiques, en une seule étape ou nested RT-PCR essais ciblant la capside et prémembrane , enveloppe , et NS gènes , et la région N non traduite Deux tests de RT-PCR ont été utilisés pour évaluer pour les gènes caspides et prémembranaires de DENV Des amplicons de taille appropriée ont été identifiés par électrophorèse en% gel d’agarose Des produits PCR ont été extraits du gel à l’aide du QIAquick Gel Extraction Kit Qiagen Sciences et séquencé directement sur un séquenceur CEQ XL Beckman Coulter La recherche d’homologies avec des séquences connues a été faite en utilisant la base de données de nucléotides de Basic Local Alignment Search Tool Les séquences nucléotidiques ont été comparées et alignées avec les séquences WNV publiées en utilisant Clustal W et le package GCG à partir de ~ μL de sérum obtenu le jour de la maladie du patient a été testé pour les acides nucléiques WNV et DENV par un dosage RT-PCR quantitative en temps réel en utilisant TaqMan

Les amorces de PCRP utilisées et les cibles de gènes évaluées dans des analyses moléculaires de tissu cutané, de sérum et d’isolat de culture cellulaire obtenues chez un patient souffrant d’une maladie mortelle du virus du Nil occidental. sérum et un isolat de culture cellulaire obtenu d’un patient atteint de la maladie mortelle du virus du Nil occidental

Résultats

Un échantillon de sérum obtenu le jour de la maladie du patient ne présentait pas d’anticorps IgG contre R rickettsii, R typhi, E chaffeensis ou A phagocytophilum par immunofluorescence. Aucun anticorps IgG anti-VNO, sérotype DENV ou virus de l’encéphalite St Louis n’a été détecté. Les titres d’anticorps neutralisants étaient de sérotype DENV, de sérotype DENV, de virus VNO, et de virus de l’encéphalite de St Louis. L’évaluation histopathologique de l’échantillon de biopsie cutanée a montré une hémorragie dans le derme superficiel de la figure A et infiltrats périvasculaires bénins des lymphocytes et des macrophages dans le derme superficiel et profond Les petits vaisseaux contenaient de multiples thrombi occlusifs de fibrine B et présentaient des lésions murales et une extravasation des érythrocytes Les dosages immunohistochimiques pour R rickettsii et N meningitidis étaient des dosages immunohistochimiques négatifs pour le virus de l’encéphalite japonaise et le MENV. largement réactif avec divers fla vivirus et des tests immunohistochimiques spécifiques du VNO ont démontré des antigènes viraux dans le cytoplasme de l’endothélium vasculaire Figure C et des cellules inflammatoires mononucléées périvasculaires Figure D Des tests immunohistochimiques pour le VNO ont également démontré des antigènes viraux extracellulaires intravasculaires fins D Aucune coloration des antigènes viraux n’a été identifiée test immunohistochimique pour YFV

View largeTélécharger la diapositive Pathologie cutanée d’un échantillon de tissu d’un patient infecté par le virus WNV du virus West Nile, localisation immunohistochimique du VNO et caractéristiques ultrastructurales d’un isolat A du VNO, Extravasation des érythrocytes dans le derme superficiel hématoxyline-éosine; grossissement original, × B, Thrombi de fibrine dans les petits vaisseaux dermiques colorant hématoxyline-éosine; grossissement original, × C et D, localisation immunohistochimique des antigènes du VNO rouge dans les cellules inflammatoires mononucléées périvasculaires et libres dans la lumière des petits vaisseaux cutanés C, phosphatase immunoalcaline avec naphtol contre-coloration rouge et hématoxyline, virus hyperimmun de souris virus de l’encéphalite anti-japonaise ascite [grossissement original, ×]; D, anticorps monoclonaux anti-WNV groupés, clones H et A [grossissement original, ×] E, WNV isolé de la peau dans des cellules Vero E Des particules sphériques avec un noyau dense et une enveloppe étroitement liée se sont accumulées dans l’espace extracellulaire acétate d’uranyle et citrate de plomb tache; pathologie cutanée d’un spécimen de tissu d’un patient ayant une infection fatale par le virus West Nile du VNO, ainsi que la localisation immunohistochimique du VNO et les caractéristiques ultrastructurales d’un isolat du VNO A, Extravasation des érythrocytes dans le derme superficiel hématoxyline-éosine tache; grossissement original, × B, Thrombi de fibrine dans les petits vaisseaux dermiques colorant hématoxyline-éosine; grossissement original, × C et D, localisation immunohistochimique des antigènes du VNO rouge dans les cellules inflammatoires mononucléées périvasculaires et libres dans la lumière des petits vaisseaux cutanés C, phosphatase immunoalcaline avec naphtol contre-coloration rouge et hématoxyline, virus hyperimmun de souris virus de l’encéphalite anti-japonaise ascite [grossissement original, ×]; D, anticorps monoclonaux anti-WNV groupés, clones H et A [grossissement original, ×] E, WNV isolé de la peau dans des cellules Vero E Des particules sphériques avec un noyau dense et une enveloppe étroitement liée se sont accumulées dans l’espace extracellulaire acétate d’uranyle et citrate de plomb tache; Aucune amplification de l’ADN de rickettsie n’a été observée à partir des extraits d’ARN de l’échantillon de biopsie cutanée inclus dans la paraffine ou de l’isolat de culture cellulaire fixé au formol. cependant, des segments de plusieurs séquences de gènes WNV ont été amplifiés à partir de ces mêmes extraits, y compris des segments bp et -bp de la paire de bases du gène NS, des segments bp et -bp des gènes caspid et prémembrane, un segment bp de la région non traduite. séquence, un segment -bp du gène NS, et les segments -bp et -bp du gène de l’enveloppe Les analyses de séquences de tous les amplicons ont montré% -% d’homologie avec les séquences correspondantes de WNV Un échantillon de sérum obtenu le jour du décès du patient. testé par un test TaqMan RT-PCR pour les sérotypes DENV – et l’acide nucléique WNV No DENV a été détecté; cependant, l’échantillon était positif pour le VNO à ~ × copies / mL pour la PCRLyalyse quantitative de la monocouche cellulaire Vero a été observée quelques jours après l’inoculation de l’échantillon de biopsie cutanée. L’examen microscopique électronique a montré des particules virales sphériques et denses de ~ nm de diamètre. le réticulum endoplasmique rugueux et le long de la membrane cellulaire Des vésicules membranaires lisses, caractéristique des flavivirus, ont également été identifiées dans le réticulum endoplasmique rugueux E L’isolat a été confirmé par coloration immunohistochimique en utilisant des anticorps monoclonaux et par PCR et séquençage de plusieurs gènes de flavivirusSeveral Un examen épidémiologique a révélé qu’une autopsie privée avait été réalisée à la demande de la famille et que ces tissus avaient été mis à la disposition des centres de contrôle et de prévention des maladies pour une évaluation histopathologique et immunohistochimique. hépatocyte épars nécrose, et foyers occasionnels de nécrose hépatocellulaire plus étendue accompagnée d’infiltrats neutrophiles, de stéatose microvésiculaire et d’érythrophagocytose par les cellules de Kupffer figure A D’autres résultats ont inclus une hémorragie intravéolaire multifocale et un œdème dans les poumons; thrombus de fibrine dans les petits vaisseaux du rein, de la rate, du poumon et de la moelle osseuse figure C; déplétion lymphocytaire de la rate; infiltrats cellulaires inflammatoires mixtes dispersés dans les glandes surrénales Le cœur, le pancréas et de multiples régions du SNC, y compris les leptoméninges, le cortex cérébral, les ganglions de la base, l’hippocampe, le mésencéphale, la moelle et le cervelet, ne présentaient aucun infiltrat cellulaire inflammatoire visible. Les antigènes du VNO dans les macrophages; les cellules inflammatoires mononucléées intravasculaires; ou endothélium vasculaire dans la peau, l’estomac, les poumons, le foie, les reins, la rate, la moelle osseuse figure B et D-G et dans diverses zones de la figure A-D CNS aucune coloration des neurones ou des cellules gliales CNS

Figure Vue largeTélécharger la diapositive Pathologie des tissus d’un patient présentant une infection fatale par le virus West Nile du VNO et localisation immunohistochimique du VNO dans le foie, la rate, les reins et le poumon du patient A, foyer de nécrose hépatocytaire et infiltrats cellulaires inflammatoires dans le foie hématoxyline-éosine tache; grossissement original, × B, antigènes de WNV dans le grossissement original des cellules de Kupffer, × C, Thrombi de fibrine dans les sinusoïdes spléniques coloration à l’hématoxyline-éosine; grossissement original, × D, antigènes du VNO dans l’endothélium vasculaire et cellules inflammatoires mononucléaires dans la rate grossissement original, × E, antigènes du VNO dans les capillaires glomérulaires grossissement original, × F, coloration intravasculaire des antigènes du VNO dans les cellules mononucléaires et l’endothélium G des vaisseaux pulmonaires grossissements d’origine, × Immunoalcalines phosphatase avec contre-coloration napthol rouge-rapide et hématoxyline, virus hyperimmun de souris encéphalite anti-japonaise liquide ascitique B, D, E et F ou anticorps monoclonaux anti-WNV groupés, clones H et A GFigure View largeTélécharger slideTissue pathologie de échantillons de tissus d’un patient ayant une infection fatale par le virus West Nile du VNO et localisation immunohistochimique du VNO dans le foie, la rate, les reins et le poumon du patient, foyer de nécrose hépatocytaire et infiltrats cellulaires inflammatoires dans le colorant hématoxyline-éosine du foie; grossissement original, × B, antigènes de WNV dans le grossissement original des cellules de Kupffer, × C, Thrombi de fibrine dans les sinusoïdes spléniques coloration à l’hématoxyline-éosine; grossissement original, × D, antigènes du VNO dans l’endothélium vasculaire et cellules inflammatoires mononucléaires dans la rate grossissement original, × E, antigènes du VNO dans les capillaires glomérulaires grossissement original, × F, coloration intravasculaire des antigènes du VNO dans les cellules mononucléaires et l’endothélium G des vaisseaux pulmonaires grossissements d’origine, × Immunoalcalines phosphatase avec contre-coloration au naphtol rouge-rapide et à l’hématoxyline, virus hyperimmun de l’encéphalite anti-japonaise, liquide ascitique B, D, E et F ou anticorps monoclonaux anti-WNV groupés, clones H et AG

Figure View largeTéléchargement slideImmunohistochemical localisation du virus du Nil occidental WNV dans les échantillons de tissu CNS d’un patient présentant une maladie mortelle WNV A, les antigènes WNV dans l’endothélium et les cellules mononucléaires intravasculaires dans un petit vaisseau dans le mésencéphale B, coloration intracellulaire des antigènes WNV dans les cellules mononucléaires dans les vaisseaux des ganglions de la base C et D, coloration intracellulaire des antigènes WNV dans les cellules mononucléaires dans le plexus choroïde Immunoalcalinophosphatase avec napthol contre-coloration rouge et hématoxyline; A et C, des anticorps monoclonaux anti-WNV groupés, des clones H et A; B et D, liquide ascitique du virus de l’encéphalite anti-japonaise de la souris hyperimmune; Grossissement original, × Figure View largeTélécharger slideImmunohistochemical localisation du virus du Nil occidental WNV dans CNS échantillons de tissus d’un patient avec la maladie WNV mortelle A, antigènes WNV dans l’endothélium et les cellules mononucléaires intravasculaires dans un petit vaisseau dans le mésencéphale B, coloration intracellulaire des antigènes WNV dans cellules mononucléées dans les vaisseaux des ganglions de la base C et D, coloration intracellulaire des antigènes WNV dans les cellules mononucléaires dans le plexus choroïde Immunoalcalinophosphatase avec napthol contre-coloration rouge et hématoxyline; A et C, des anticorps monoclonaux anti-WNV groupés, des clones H et A; B et D, liquide ascitique du virus de l’encéphalite anti-japonaise de la souris hyperimmune; grossissements originaux, ×

Discussion

oduce une virémie à titre élevé avant d’envahir le SNC le VNO est tropique pour les neurones et les microglies chez les patients atteints d’encéphalite mortelle ; Les études d’autres flavivirus, y compris le DENV, ont identifié la réplication virale dans les macrophages et les monocytes Nous avons trouvé des antigènes du VNO dans l’endothélium et dans les cellules inflammatoires mononucléaires intravasculaires et périvasculaires, vraisemblablement les monocytes et les macrophages. Les études récentes sur des souris infectées par le VNO indiquent que les virus les antigènes peuvent également se localiser dans les hépatocytes et les capillaires hépatiques La localisation du VNO dans l’endothélium vasculaire n’est pas une preuve définitive d’une réplication virale active dans les cellules endothéliales et pourrait représenter une pinocytose des antigènes viraux; cependant, certaines manifestations de la maladie du VNO chez les humains, y compris la vascularite rétinienne et les exanthèmes fréquents décrits chez environ% à% des patients atteints de la maladie invasive du SNC et% -% des patients atteints de la fièvre West Nile [,, -], suggèrent des lésions microvasculaires Des lésions hémorragiques du poumon, de la rate, du pancréas, du coeur, du tractus gastro-intestinal et du SNC ont également été décrites dans les infections mortelles au VNO aviaire. Cependant, les macrophages, les monocytes, les cellules de Kupffer et Les cellules réticulo-endothéliales de la rate semblent être les principales cibles de l’infection virale chez les oiseaux, et les antigènes du VNO ont été rarement documentés dans le muscle lisse vasculaire ou l’endothélium de quelques espèces aviaires Le mécanisme physiopathologique responsable de la L’évolution clinique chez ce patient est inconnue. Tous les isolats nord-américains du VNO présentent des homologies de séquences de nucléotides et d’acides aminés élevées , suggérant Cependant, les virémies enregistrées chez les patients américains infectés par le VNO sont considérablement plus faibles que la virémie identifiée pour le patient décrit dans cet article, et il est possible que: Une étude récente sur des cohortes de patients atteints d’une maladie à VNO confirmée en laboratoire a démontré qu’un allèle défectueux pour les monocytes et le récepteur de chimiokine des lymphocytes T CCR CCRΔ est un facteur de risque génétique d’infection symptomatique par le VNO, et que les personnes CCRΔ-homozygotes qui n’ont pas de fonction CCR peuvent être plus à risque de VNO mortelle que les personnes infectées par le VNO dans la population générale . D’autres études ont identifié un polymorphisme nucléotidique unique. un gène OASL de type OAS oligoadénylate-synthétase qui se produit à Les transcrits d’ARN de ce gène subissent une augmentation de l’épissage et aboutissent à une isoforme OASL mutante similaire à l’isoforme b mutante du gène OAS chez la souris. Susceptibilité Les souches consanguines de souris de laboratoire qui expriment le gène Oasb mutant développent généralement une méningoencéphalite sévère et meurent après l’inoculation du virus WNV et le virus se réplique à des titres élevés dans des cultures de macrophages spléniques et péritonéaux préparés à partir de souris sensibles. En revanche, les espèces mus sauvages expriment l’allèle de type sauvage de Oasb, et sont naturellement résistantes au VNO et aux autres flavivirus. La réplication du VNO est plus faible, voire totalement inhibée, dans les macrophages récoltés sur des souches résistantes chez la souris . DENV anticorps chez ce patient suggère qu’il avait été infecté auparavant avec au moins sérotype DENV Pre-exis l’anticorps anti-DENV est considéré comme un facteur de risque de développement de la fièvre hémorragique dengue lors d’une exposition subséquente à un sérotype hétérologue du virus. On n’a pas déterminé si une infection antérieure par un flavivirus posait un risque ou constituait un facteur préventif du développement d’une maladie grave du VNO. Bien qu’il soit clair que les anticorps anti-DENV ne protègent pas ce patient contre une infection mortelle par le VNO, on ne sait pas si ces anticorps ont contribué à la gravité de sa maladie, notamment l’hépatite, la pancréatite et la myocardite. ont été rapportés chez des patients d’Afrique, d’Israël et de Russie [,, -], et plus récemment, chez quelques patients américains Ce rapport ajoute aux données antérieures qui documentent l’implication du VNO de plusieurs organes au-delà du SNC. certaines personnes développent une maladie sévère après l’infection par le VNO et d’autres ont une maladie plus bénigne ou restent asymptomatiques reste une question importante g une étude plus approfondie

Remerciements

Nous remercions Joseph Singleton pour le test d’anticorps par immunofluorescence des espèces Rickettsia, Ehrlichia et Anaplasma; Olga Kosoy pour le test sérologique des flavivirus; William Anderson pour avoir fourni les spécimens d’autopsie; Mitesh Patel pour avoir préparé les figures; et Marina Eremeeva pour la traduction Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: aucun conflit