Cytokines circulantes chez les patients atteints d’une maladie des griffes du chat

Les niveaux d’interleukine circulante IL-, IL- et IL-, mesurés par un dosage immuno-enzymatique, étaient significativement plus élevés chez les patients atteints d’une maladie des griffes du chat que chez les sujets témoins en bonne santé; aucune induction d’IL- n’a été observée et les taux d’interféron-γ et d’IL- n’étaient généralement pas détectables. Il s’agit du premier rapport montrant des taux accrus de cytokines circulantes chez les patients atteints de CSD. L’induction de ces médiateurs peut expliquer en partie certaines caractéristiques cliniques et pathologiques maladie

à une morbidité considérable Le diagnostic spécifique du microorganisme responsable, Bartonella henselae, peut maintenant être déterminé par culture, immunofluorescence, ELISA et PCR , permettant une meilleure compréhension de l’épidémiologie des CSD Cependant, les mécanismes impliqués dans la pathogenèse de la maladie sont L’implication de l’immunité cellulaire est fortement suggérée par la réaction d’hypersensibilité retardée à l’antigène CSD avec test cutané, utilisé depuis de nombreuses années comme critère diagnostique majeur . Cependant, seules quelques études ont évalué les réponses lymphocytaires La prolifération lymphocytaire spécifique confirme le rôle important de l’immunité à médiation cellulaire dans les CSD, mais elle offre peu d’informations sur les mécanismes de ce processus, qui comprennent un réseau de plus en plus complexe de lymphocytes T cytotoxiques. cytokines, les chimiokines, les antigènes de surface, et plus L’étude de ces médiateurs peut révéler de nouveaux pote des cibles thérapeutiques originales, qui sont certainement nécessaires pour la prise en charge des CSD. La première tentative d’une telle approche a été récemment rapportée; il s’agissait d’un modèle expérimental avec des souris , dans lequel l’induction de l’IFN-γ des splénocytes d’animaux infectés par B henselae a été observée. Nous avons émis l’hypothèse qu’une réponse immunitaire cellulaire vigoureuse chez les patients atteints de CSD entraînerait des changements pro-inflammatoires et / ou des cytokines régulatrices des cellules T qui pourraient être détectées dans le sérum des patients atteints de CSD Afin de confirmer cette hypothèse, nous avons examiné les taux d’IL-, IL-, IL-, IL-, IL-, et IFN-γ dans les échantillons de sérum Des échantillons de sérum prélevés chez des patients avec un diagnostic clinique de CSD ont été envoyés à notre laboratoire pour la détection d’anticorps dirigés contre B henselae. Les patients étaient des garçons et des filles d’âge moyen [± SD], ± ans. eu une lymphadénopathie régionale, température de la fièvre, & gt; ° C, une histoire et / ou une preuve objective de contact récent avec un chat, et des résultats négatifs sur les examens pour d’autres causes possibles de lymphadénopathie Des échantillons de sérum ont été obtenus de tous les patients après semaine et avant semaine après le début de la maladie Des tests cutanés antigéniques et / ou des biopsies ganglionnaires n’ont pas été réalisés chez ces patients pour des raisons communément évoquées dans la littérature, à savoir la sécurité et les complications potentielles composé d’enfants garçons qui ont été admis à notre hôpital pour une chirurgie élective mineure; l’âge moyen ± écart type était de ± ans Des échantillons de sang ont été obtenus à partir de la ponction veineuse effectuée pour des tests diagnostiques programmés, avant toute autre manipulation médicale, et le consentement éclairé a été obtenu des parents dans tous les cas. la détection d’IgG, les échantillons de sérum ont été dilués en série à: -: dans du PBS salin tamponné au phosphate; Sigma-Aldrich LTD Le sérum dilué a été incubé sur la lame de substrat pendant min à température ambiante. Pour la détection des anticorps IgM, des échantillons de sérum ont été dilués à: dans du PBS contenant du sérum anti-humain IgG de chèvre hyperimmun sérumPharmalex pour précipiter IgG. à la température ambiante, puis à d’autres dilutions successives dans du PBS jusqu’à: La période d’incubation de la lame de substrat pour les anticorps IgM était de h. Les lames étaient ensuite lavées deux fois avec du PBS et de l’IgG de chèvre anti-humaine conjuguée à de l’isothiocyanate de fluorescéine. Après plusieurs lavages, les lames ont été montées et le titre final a été déterminé indépendamment par les observateurs. Les échantillons ont été considérés comme positifs si le titre d’IgG était ⩾: et / ou le titre d’IgM était ⩾. : Des kits disponibles dans le commerce Biosource pour la détection de IL-, IL-, IL-, IL-, IL-, et IFN-γ dans des échantillons de sérum ont été utilisés selon les tructions Chaque échantillon a été dosé en double. La sensibilité des dosages était de pg / ml, pour IL-; pg / ml, pour IL-; pg / ml, pour IL-; pg / ml, pour IL-; pg / ml, pour IL-; et pg / mL, pour IFN-γ Les résultats sont présentés comme valeurs moyennes ± erreur-type de la moyenne Le test t de Student a été utilisé pour la comparaison des moyennes, et une analyse de régression a été utilisée pour évaluer toute corrélation entre différents niveaux de cytokine. a été considérée comme significative. Résultats Dix-sept% des patients ont présenté un anticorps anti-B henselae: avaient un titre d’IgM seulement, avaient un titre d’IgG et avaient des IgM et des IgG. Tous les enfants du groupe témoin étaient négatifs. dans les échantillons sériques de patients atteints de CSD était significativement plus élevé que dans les échantillons sériques de sujets témoins ± pg / mL, dans la plage de – pg / mL, vs ± pg / mL, dans la gamme de – pg / mL; P & lt; ; Figure A Les cas confirmés sérologiquement présentaient des taux d’IL un peu plus élevés que les cas négatifs d’anticorps ± pg / mL vs ± pg / mL; cependant, cette différence n’était pas statistiquement significative.

Figure vue grandDownload slideSerum niveaux de IL-A, IL-B, IL-C et IL-D chez les patients atteints de barres noires de maladie de grattage du chat, en comparaison avec ceux chez les sujets témoins sains barres blanches *, P & lt; ; **, P & lt; Figure vue grandDownload slideSerum niveaux de IL-A, IL-B, IL-C et IL-D chez les patients atteints de barres noires de maladie de grattage du chat, en comparaison avec ceux chez les sujets témoins sains barres blanches *, P & lt; ; **, P & lt; Une concentration accrue d’IL- a également été observée chez les patients atteints de DMC ± pg / mL, dans une plage de – pg / mL, par rapport à ± pg / mL, dans une plage de – pg / mL, chez les sujets témoins; P & lt; ; Figure B Les cas de CDD anticorps-négatifs ont des concentrations de IL plus élevées que les cas positifs aux anticorps, mais encore une fois, cette différence n’est pas significative ± pg / mL vs ± pg / mL; P = En outre, IL- était significativement augmenté chez les patients atteints de CSD ± pg / mL, dans une gamme de – pg / mL, vs ± pg / mL, dans une gamme de – pg / mL, pour les sujets témoins; P & lt; ; Les échantillons de sérum positif et négatif de l’anticorps CB henselae présentaient des valeurs identiques pour ce paramètre ± pg / ml vs ± pg / mlLorsque toutes les comparaisons ci-dessus ont été faites pour les patients avec des cas sérologiquement prouvés versus témoins, les significations statistiques sont restées inchangées progressif. entre les groupes ont été observés en ce qui concerne les niveaux d’IL- les taux D IL- et IFN-γ n’étaient pas détectables dans ces échantillons de sérum, à l’exception de l’échantillon positif à l’IL- et des échantillons positifs à l’IFN-γ, tous qui provenaient de patients avec CSDWhen lorsque l’analyse de régression a été effectuée entre les niveaux de différentes cytokines ou les titres d’anticorps B henselae, IL- a été trouvé pour corréler de manière significative avec IL- r =; P & lt; ; figure, mais aucune autre corrélation significative a été observée données non montrées

Figure Vue largeDownload slide Corrélation positive r entre les niveaux d’IL- et d’IL- circulants chez les patients atteints d’une maladie des griffes du chat r =; P & lt; Figure Vue largeDownload slide Corrélation positive r entre les niveaux d’IL- et d’IL- circulants chez les patients atteints d’une maladie des griffes du chat r =; P & lt; Discussion L’activation de l’immunité cellulaire chez les patients atteints de CSD a été postulée sur la base de rapports précoces de la maladie, lorsqu’une réaction cutanée d’hypersensibilité retardée à l’antigène CSD a été observée Il est surprenant que seules quelques études rapportées dans la littérature tenté de confirmer cette observation in vitro ou ex vivo En fait, la première de ces études n’a pas montré de réponses spécifiques de prolifération lymphocytaire à l’antigène CSD chez les patients atteints de CSD ; des années plus tard, avec l’utilisation d’une préparation CSD plus élaborée . Cependant, une décennie plus tard, la signification du terme «immunité cellulaire» s’est considérablement élargie, y compris une myriade de médiateurs solubles, de sous-types cellulaires et d’antigènes de surface. il est donc nécessaire de définir les composants spécifiques de l’immunité des lymphocytes T impliqués dans les CSD, non seulement dans le cadre d’une compréhension plus approfondie du processus pathologique, mais aussi – et plus important encore – pour la délimitation de nouvelles cibles thérapeutiques. des cytokines circulantes pro-inflammatoires et / ou régulatrices des cellules T chez les patients atteints de CSD, parce que ce problème n’a pas été abordé précédemment Selon nos résultats, IL-, IL-, et IL- sont significativement régulés positivement dans le sérum des patients CSD. L’IL- peut donc jouer un rôle considérable dans l’induction et / ou l’augmentation de la réponse des lymphocytes T dans les CSD. En outre, il peut aider à expliquer la susceptibilité Les patients immunodéprimés, comme les patients atteints du SIDA, à B henselae IL- est une cytokine multipotente essentielle à l’induction de l’inflammation. Ses taux sont bien corrélés avec les scores cliniques chez des patients atteints de diverses maladies, telles que le myélome multiple, le syndrome de Kawasaki. , et la pneumonie Il a été proposé que IL- pourrait être utile en tant que marqueur d’inflammation, et qu’il pourrait être supérieur au nombre de leucocytes ou à la protéine C-réactive Il a également été proposé que IL- a un rôle important dans la induction d’une réponse immunitaire efficace contre Mycobacterium tuberculosis et Francisella tularensis , qui produisent des caractéristiques pathologiques similaires à celles de B henselae. Par conséquent, l’augmentation de l’IL- chez les patients atteints de CSD stimule l’intérêt pour le rôle de cette cytokine dans la pathogenèse Au contraire, l’IL- est un puissant médiateur anti-inflammatoire Par conséquent, il peut avoir un rôle clé dans le contrôle de la réponse immunitaire cellulaire vigoureuse à CSD It i Nous avons récemment rapporté un résultat similaire concernant les patients atteints de pneumonie communautaire, ce qui a conduit les auteurs à émettre l’hypothèse que IL- pourrait contrôler la cascade des cytokines, peut-être en tant que mécanisme de protection Ceci est confirmé par des études montrant de faibles taux d’IL- chez les patients qui n’ont pas survécu au sepsis, contrairement aux taux chez les survivants Dans nos expériences, la présence d’anticorps dirigés contre B henselae a été notée chez suspicion clinique de DSC, ce qui est cohérent avec les pourcentages rapportés dans la littérature Le profil cytokinique des cas sérologiquement négatifs était légèrement – mais pas significativement – différent des cas de CSD confirmés sérologiquement Bien que B henselae soit actuellement la principale cause de DSC, le même syndrome clinique peut être causé par Bartonella quintana, Bartonella clarridgeiae ou Afipia felis Lymphadénopathie due à d’autres causes, L’histoire du contact avec un chat pourrait avoir été une coïncidence, est également possible. Dans tous les cas, nos résultats n’ont pas différé si oui ou non les cas sérologiquement négatifs ont été inclus dans l’analyse. En conclusion, ceci est la première étude à montrer une upregulation des cytokines circulantes, à savoir, IL-, IL-, et IL-, chez les patients atteints de CSD L’induction de ces médiateurs, qui sont critiques dans la régulation de l’inflammation ainsi que l’immunité cellulaire, peut en partie expliquer certaines caractéristiques cliniques et pathologiques de la maladie. évaluer les conséquences de ces observations sont maintenant nécessaires